5'-腺苷磷酰硫酸激酶及其R68K突变体对5'-腺苷-磷酸3'羟基的磷酸化

• 作者: 孙梅好 杨洋 马建辉 黄园波
• 来源期刊: 山西农业科学
• 关键词: 腺苷磷酰硫酸激酶 腺苷一磷酸 磷酸化
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 生理生化
• 页码范围: 561-566,589
• 页数: 7页
• 分类号: Q555+.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2481.2013.06.12

摘要

硫作为生命活动的必需元素,主要以-2价和+6价发挥生物学功能.硫的同化代谢包括胞内活化、转移以及还原等反应.其活化是同化代谢的关键反应,包括ATP硫酸化酶(ATP sulfurylase,ATPS)催化硫酸盐与ATP反应生成腺苷-5'-磷酰硫酸(adenosine 5'-phosphosulfate,APS)和焦磷酸(pyrophosphate,PPi)以及腺苷-5'-磷酰硫酸激酶(adenosine 5'-phosphosulfate kinase,APSK)催化APS 3'羟基磷酸化生成3'-磷酸腺苷-5-磷酰硫酸(3'-phosphoadenosine 5'-phosphosulfate,PAPS),APSK催化APS磷酸机理已经较为清楚.利用APSK对AMP的磷酸化进行了初步分析,发现AMP可作为APSK的底物,反应生成3,5'二磷酸腺苷(3'-phosphoadenosine 5'-phosphate,PAP)；对APSK的三维结构进行分析发现,R68同时和APS的磷酸根和硫酸根形成氢键,稳定APS的结合,而K侧链基团比R短2.4(A),R68K突变将导致K不能和距离较远的硫酸根离子相互作用,从而减弱APS的亲和力,而增加与磷酸根离子的相互作用,可能提高AMP的亲和力.研究结果表明,R68K突变体的最适底物变为AMP,KmAMP是对照的0.2倍,而催化效率是对照的5倍.以R68K为偶联酶成功测定了具有较低KmPAP的酵母3,5二磷酸核苷酸酶(3',5'-bisphosphate nucleotidase,YND)动力学常数,为分析测定AMP底物的酶活提供了工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙梅好	浙江师范大学化学与生命科学学院	29	45	4.0	5.0
2	马建辉	浙江师范大学化学与生命科学学院	6	17	3.0	3.0
3	杨洋	浙江师范大学化学与生命科学学院	9	12	2.0	3.0
4	黄园波	浙江师范大学化学与生命科学学院	2	5	2.0	2.0