离体大鼠心肌内质网应激模型构建条件的优化

• 作者: 刘越 吴扬 宁明 尹新华 张改改 滕旭 齐永芬
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 心脏 内质网应激 缺血/再灌注损伤 组织切片孵育 糖调节蛋白78
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 5604字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2013.06.001

摘要

目的 探讨构建体外心肌内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)模型的方法及实验条件.方法 应用Langendorff灌流装置制作大鼠心脏离体缺血/再灌注模型,采用PowerLab系统持续监测血流动力学参数,Western blot检测缺血(停止灌流)不同时间/再灌注120 min后心肌ERS标志性分子糖调节蛋白(GRP) 78的表达,并检测C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测二者mRNA的表达;体外孵育心肌组织切片,分别应用不同浓度的衣霉素(tunicamycin,Tm)和二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT)处理3h和6h,Westem-blot检测心肌GRP78及CHOP的表达.结果 与对照组相比,离体灌注心脏缺血40 min/再灌注120 min时,心肌GRP78表达最高(P＜0.01),CHOP蛋白、GRP78 mRNA及CHOP mRNA表达均明显升高(P ＜0.01,P＜0.05和P＜0.05),同时,各项血流动力学参数受损(均P＜0.01);Tm 10 μg/mL和DTT 2 mmol/L孵育心肌组织切片3h时,GRP78表达较对照组显著升高(均P＜0.001),CHOP表达亦均明显升高(P＜0.05和P＜0.01).结论 使用离体大鼠心脏缺血/再灌注和孵育心肌组织切片的方法,均可成功构建体外心肌ERS模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹新华	哈尔滨医科大学第一附属医院心内科	59	216	8.0	12.0
2	刘越	哈尔滨医科大学第一附属医院心内科	29	84	6.0	7.0
3	齐永芬	北京大学医学部教育部分子心血管病学重点实验室	97	957	16.0	26.0
4	张改改	清华大学第一附属医院北京华信医院老年医学科	4	11	2.0	3.0
5	滕旭	北京大学医学部教育部分子心血管病学重点实验室	3	46	2.0	3.0
6	吴扬	清华大学第一附属医院北京华信医院老年医学科	3	20	3.0	3.0
7	宁明	清华大学第一附属医院北京华信医院老年医学科	3	20	3.0	3.0