轻型链球菌临床分离株psaA基因敲除株的构建及其毒力影响的初步研究

• 作者: 刘聚伟 刘进 张巧 李瑾 林科雄 王长征 马千里
• 来源期刊: 中华肺部疾病杂志（电子版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎链球菌表面蛋白A 轻型链球菌 基因敲除 鼻咽部定植
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 19-22
• 页数: 4页
• 分类号: R378.1
• 字数: 3059字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-6902.2013.05.007

摘要

目的 构建轻型链球菌(S.mitis)临床分离株S.mitis008肺炎链球菌表面蛋白A(psaA)基因敲除菌株S.mitis00801,并检测其生长及毒力影响,为进一步分析轻型链球菌属细菌间psaA基因水平转移的功能学意义奠定基础.方法 采用长臂同源多聚酶链反应技术(LFH-PCR)构建含红霉素耐药基因(erm)片段及psaA基因上、下游同源序列的连接片段,并转化至S.mitis008中,在含红霉素的平板上筛选psaA基因敲除菌株,并采用PCR鉴定；进一步观察psaA基因敲除株S.mitis00801体外生长情况,并利用小鼠模型观察S.mitis008和S.mitis00801鼻咽部定植能力的差异.结果 PCR结果均证实轻型链球菌psaA基因敲除菌株S.mitis00801构建成功；S.mitis008和S.mitis00801体外生长情况比较无差异；在轻链球菌CBA/n小鼠鼻咽部定植模型中,psaA基因敲除菌株S.mitis00801定植能力较未敲除株S.mitis008明显减少,存在统计学差异(P＜0.01).结论 LFH-PCR技术构建psaA基因敲除菌株S.mitis00801方法切实可行,psaA基因的敲除对细菌的体外生长无影响,但降低了细菌在体内鼻咽部定植的能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张巧	第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所	32	258	9.0	14.0
2	马千里	第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所	24	257	10.0	15.0
3	王长征	第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所	184	1742	21.0	31.0
4	林科雄	第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所	48	378	11.0	17.0
5	李瑾	第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所	13	37	3.0	5.0
6	刘聚伟	解放军第309医院西山门诊部	6	6	2.0	2.0
7	刘进	第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所	1	0	0.0	0.0