过表达CD133对脑胶质瘤U251细胞生物学行为的影响

• 作者: 居颂光 张学光 葛彦 邓云 陆婷 马晓花
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD133 脑胶质瘤 U251细胞 逆转录病毒 致瘤性
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 438-443
• 分类号: R739.41|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2013.04.010

摘要

目的:构建稳定表达人CD133基因的脑胶质瘤U251细胞株,并探讨CD133对U251细胞生物学行为的影响.方法:将人CD133全长cDNA构建入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term,包装成逆转录病毒pEGZ-Term-CD133,进而感染脑胶质瘤U251细胞株.流式细胞术及Real-time PCR检测感染后U251细胞CD133分子的表达.细胞计数法、神经球形成实验观察CD133过表达对U251细胞体外的增殖和神经球形成的影响.裸鼠皮下成瘤法检测感染后U251细胞的体内致瘤性.结果:成功构建pEGZ-Term-CD133逆转录病毒表达载体,并获得稳定表达CD133的U251细胞.相比U251-mock、U251细胞,U251-CD133细胞高表达CD133 mRNA [(7400.2±5003.4) vs(2.0±1.1)、(1.0±2.2),均P=0.0007)和蛋白.感染pEGZ-Term-CD133对U251细胞的体外增殖并无影响(P＞0.05)；但在无血清神经干细胞培养条件下,U251-CD133细胞所形成的神经球数量显著高于U251-mock和U251细胞[(34.0±7.5)vs(14.6±2.3)、(11.5±1.3)个,均P＜0.01].接种量为1×105个细胞时,U251-CD133细胞在裸鼠体内的成瘤时间(32 d)少于U251-mock细胞(38 d)、成瘤率更高(100％vs30％),在第41天时,肿瘤体积显著增大[(180.3±146.8) vs (4.0±0.0)mm3,P =0.003].结论:CD133分子不影响脑胶质瘤U251细胞的体外增殖,但可促进U251细胞神经球的形成和致瘤性.