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摘要:
目的:利用针对兰尼碱受体1(Ryanodine receptor 1,RyR1)的小干扰RNA(siRNA),研究沉默RyR1基因表达对人肺癌细胞株A549细胞生物学活性的影响.方法:(1)设计并合成针对RyR1基因的siRNA及阴性对照片段(不针对任何已知人的mRNA)和阳性对照片段(沉默GAPDH内参基因),转染肺癌细胞A549;(2)实时荧光定量-PCR(Real-time fluorogentic quantitative PCR,FQ-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)分别检测转染后RyR1 mRNA表达及RyR1蛋白表达的变化;(3)MTT实验检测转染前后细胞增殖能力的变化;(4)流式细胞术检测转染前后细胞周期及细胞凋亡的状态.结果:(1) FQ-PCR结果显示RyR1 siRNA-1969可下调RyR1 mRNA的表达,相对表达量与阳性对照组和阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);(2)转染RyR1 siRNA后RyR1蛋白表达下调;(3)MTT实验显示RyR1表达沉黙后的A549细胞生长缓慢,与对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05);(4)转染后细胞凋亡率较空白对照组(正常培养的A549细胞)和阴性对照组(转染阴性对照小RNA片段的A549细胞株)显著增高(P<0.001),处于G0~G1期的细胞明显增多(P<0.001).结论:RyR1基因可能为肺癌的基因治疗提供新策略.
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文献信息
篇名 RyR1基因沉默对人肺癌细胞生物学活性的影响
来源期刊 广西医科大学学报 学科 医学
关键词 肺癌 RyR1基因 siRNA 转染 A549细胞株
年,卷(期) 2013,(6) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 856-859
页数 4页 分类号 R734.2
字数 3906字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 刘德森 广西医科大学附属肿瘤医院胸瘤外科 45 162 7.0 9.0
2 潘泓 广西医科大学附属肿瘤医院胸瘤外科 47 129 5.0 8.0
3 赵冰冰 广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科 12 38 3.0 5.0
4 薄龙 广西医科大学附属肿瘤医院胸瘤外科 1 1 1.0 1.0
5 黄明方 广西医科大学附属肿瘤医院胸瘤外科 1 1 1.0 1.0
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广西医科大学学报
月刊
1005-930X
45-1211/R
大16开
广西南宁市双拥路22号
1971
chi
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