可利霉素对胰腺癌细胞生物学功能的影响

• 作者: 白丽娜 刘颖 唐春晓 朴红心 林贞花 杨万山 金爱花
• 来源期刊: 临床肝胆病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺肿瘤 细胞增殖 细胞运动 上皮-间质转化
• 年，卷（期）: 2023,（12）
• 所属期刊栏目: 胰腺疾病
• 页码范围: 2793-2801
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.12.020

摘要

目的 探讨可利霉素(Carrimycin)对胰腺癌细胞生物学功能的影响。 方法 胰腺癌细胞MIA PaCa-2、BxPC-3、Panc-1和PATU 8988以0(对照组)、2、4、8和16 μmol/L的可利霉素处理24、48和72 h后，MTT法检测细胞活性；EdU细胞增殖实验检测可利霉素对胰腺癌细胞DNA复制能力的影响；集落形成实验检测可利霉素对胰腺癌细胞增殖能力的影响；流式细胞术分析可利霉素对胰腺癌细胞周期的影响；划痕愈合实验分析可利霉素对胰腺癌细胞迁移能力的影响；免疫蛋白印迹实验检测上皮细胞-间充质转化和细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(P21)等标志物的表达水平；免疫荧光实验检测上皮间质转化相关标志物的表达水平。多组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。 结果 与对照组相比，可利霉素可显著抑制MIA PaCa-2、BxPC-3、Panc-1和PATU 8988细胞的增殖活性，且呈药物浓度与时间依赖性(P值均＜0.01)；4、8、16 μmol/L可利霉素可显著降低PC细胞MIA PaCa-2(t值分别为2.378、4.984、18.970，P值均＜0.05)及BxPC-3(t值分别4.879、6.089、9.521，P值均＜0.01)的DNA复制能力；4、8、16 μmol/L可利霉素处理PC细胞14 d后，MIA PaCa-2(t值分别为5.889、11.240、15.840，P值均＜0.001)和BxPC-3(t值分别为6.717、15.800、18.850，P值均＜0.001)细胞的集落形成能力随着药物浓度的增加而明显减少。4、8、16 μmol/L可利霉素处理后MIA PaCa-2细胞G1期比例(t值分别为9.071、12.280、19.360，P值均＜0.000 1)及BxPC-3细胞G1期比例(t值分别为3.061、4.962、8.868，P值均＜0.05)均增加，MIA PaCa-2细胞S期比例(t值分别为2.316、4.165、5.562，P值均＜0.05)及BxPC-3细胞S期比例(t值分别为2.424、3.264、5.744，P值均＜0.05)均降低。Western Blot实验进一步证实，与对照组比较，周期相关蛋白P21在MIA PaCa-2(t值分别为5.437、6.453、8.799，P值均＜0.001)和BxPC-3细胞(t值分别为25.130、44.750、52.960，P值均＜0.000 1)中的表达水平随可利霉素用药浓度增加而逐渐上调。划痕愈合实验结果显示，0和4、8、16 μmol/L可利霉素处理12、24和48 h PC细胞MIA PaCa-2(P值均＜0.05)及BxPC-3(P值均＜0.05)的横向迁移能力明显减弱。Western blot实验结果显示，与对照组比较，4、8、16 μmol/L可利霉素处理后MIA PaCa-2(t值分别为2.388、4.899、5.819，P值均＜0.05)及BxPC-3细胞(t值分别为2.533、5.836、6.774，P值均＜0.05)中上皮标志物E-cadherin的表达明显上调，4、8、16 μmol/L可利霉素处理后MIA PaCa-2(t值分别为12.440、14.830、16.800，P值均＜0.000 1)及BxPC-3细胞(t值分别为5.039、5.893、7.725，P值均＜0.01)中间质标志物Snail的表达水平显著下调，4、8、16 μmol/L可利霉素处理后MIA PaCa-2(t值分别为3.105、7.752、11.200，P值均＜0.05) 及BxPC-3细胞(t值分别为2.555、4.883、9.153，P值均＜0.05)中间质标志物Vimentin的表达水平也显著下调。 结论 可利霉素可有效抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移及上皮细胞-间充质转化进程，从而发挥其抗肿瘤的生物学活性。