GAL4/VP16融合人工转录因子的活性研究

• 作者: 应磊 张萍 徐让 钱关祥
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: GAL4/VP16 人工转录因子 增强型绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 404-408
• 页数: 5页
• 分类号: Q522
• 字数: 3455字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2013.04.005

摘要

目的 构建含有融合转录因子GAL4/VP16的表达载体和含有上游激活序列(UAS)启动子驱动报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达载体组成的GAL4/VP16-UAS系统,观察融合转录因子GAL4/VP16的活性.方法 构建含有融合转录因子GAL4/VP16的表达载体pcDNA3-GAL4/VP16,含有5个拷贝UAS串联排列序列和腺病毒E1b基因核心启动子的人工杂合启动子驱动报告基因EGFP的表达载体pGL3-G5E1b-TATA-EGFP,利用脂质体将两种载体瞬时转染Hep3B和HEK293细胞,48 h后采用RT-PCR和流式细胞术检测EGFP的表达,观察GAL4/VP16融合转录因子对G5E1B-TATA的转录调节作用.结果 在GAL4/VP16融合转录因子存在的情况下,G5E1b-TATA启动子活性明显上调,甚至可以达到巨细胞病毒(CMV)启动子的活性程度.结论 GAL4/VP16融合转录因子具有上调G5E1B-TATA启动子转录活性的作用,并且该转录活性足以达到驱动下游目的基因高效表达的水平,在基因治疗和基因功能的研究中具有一定的应用潜力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张萍	上海交通大学基础医学院生物化学与分子细胞生物学系	73	396	11.0	16.0
2	钱关祥	上海交通大学基础医学院生物化学与分子细胞生物学系	13	59	5.0	7.0
3	徐让	上海交通大学医学院附属新华医院科研中心	16	27	3.0	4.0
4	应磊	上海交通大学基础医学院生物化学与分子细胞生物学系	1	2	1.0	1.0