鼠疫菌Fur蛋白对waaA的转录调控研究

• 作者: 倪斌 刘磊 周冬生 张义全 杨瑞馥 王丽
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 鼠疫耶尔森菌 转录调控 Fur waaA
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 498-501
• 页数: 4页
• 分类号: R378.6
• 字数: 2466字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2013.07.005

摘要

目的 从转录水平上研究鼠疫耶尔森菌Fur蛋白对waaA的转录调控机制.方法 提取鼠疫菌野生株(WT)和fur突变株(Δfur)的总RNA,采用引物延伸实验研究waaA的转录起始位点,并根据产物的丰度判断Fur蛋白对waaA的调控关系.构建克隆有waaA上游启动子区的LacZ重组质粒,将重组质粒转入WT和Δfur中,通过测定β-半乳糖苷酶活性来比较两株重组菌中的waaA启动子活性,进一步验证Fur蛋白对waaA的调控关系.PCR扩增waaA启动子区DNA序列全长,并纯化鼠疫菌His-Fur蛋白,通过体外的凝胶阻滞实验,即电泳迁移率变动实验(EMSA)和DNaseⅠ足迹实验验证His-Fur蛋白对waaA启动子区是否具有直接的结合作用.结果 与结论DNaseⅠ足迹实验表明,Fur蛋白对waaA启动子区的结合位置为-204至-150之间的碱基(翻译起始位点为+1);引物延伸实验显示waaA有一个转录起始位点T(-26),且该位点的转录活性直接被Fur蛋白激活.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨瑞馥	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	180	1706	21.0	33.0
2	王丽	重庆医科大学公共卫生与管理学院	36	196	8.0	11.0
3	张义全	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	9	17	3.0	3.0
4	倪斌	江苏大学基础医学与医学技术学院	11	18	2.0	4.0
5	刘磊	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	2	0	0.0	0.0