奶山羊过氧化物酶体增殖物激活受体基因(PPARγ)的克隆、表达及功能初步分析

• 作者: 史怀平 姚大为 孙雨婷 朱江江 李君 石恒波 罗军
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 奶山羊 PPARγ基因 组织表达 脂肪酸代谢
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1068-1075
• 页数: 8页
• 字数: 5630字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2013.09.008

摘要

过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator activated receptor γ,PPARγ)在脂肪和糖代谢平衡中起重要作用.为研究奶山羊(Capra hircus)PPARγ基因在泌乳过程中的生理功能,本研究以西农萨能奶山羊乳腺组织为材料,利用RT-PCR和RACE技术,克隆奶山羊PPARγ基因cDNA全长；利用荧光定量PCR检测该基因在奶山羊10个组织以及不同泌乳时期乳腺组织中的表达量；利用PPARγ特异性激动剂罗格列酮(rosiglitazone,ROSI)处理乳腺上皮细胞后,荧光定量PCR检测细胞内脂肪酸代谢相关基因的表达量.结果表明,奶山羊PPARγ基因cDNA序列全长为1 751 bp(GenBank登录号为:HQ589347)；同源性分析发现,PPARγ基因在哺乳动物间有较强的保守性；结构预测表明,奶山羊PPARγ蛋白具有2个锌指结构以及配体结合域；组织表达谱分析显示,PPARγ基因在奶山羊的脂肪组织中表达量最高,其次是瘤胃,而肌肉组织表达量最少；奶山羊两个泌乳时期乳腺组织中PPARγ表达量分析表明,泌乳盛期的表达量约是干乳期的2倍.罗格列酮处理乳腺上皮后检测发现,细胞内脂肪酸代谢相关基因:脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,LPL)、.脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP3)、脂肪分化相关蛋白(adipose differentiation related protein,ADRP)和47 kD尾部相互作用蛋白(47-kD tail interacting protein,TIP47)等表达量显著性上调.研究结果提示,PPARγ基因在奶山羊泌乳过程的脂肪酸代谢中可能其重要作用,为进一步研究奶山羊个体水平调控乳脂生成、改善乳脂品质和发挥乳腺生物反应器功能提供基础资料.