建立一种survivin抗原肽诱导T淋巴细胞优势取用TCR Vβ基因的方法

• 作者: 吴凤麟 林燕梅 沈晗 肖兰凤 邵红伟 黄树林
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: survivin DC负载抗原 TCR Vβ表达谱
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 300-303
• 页数: 4页
• 分类号: R392.9
• 字数: 3492字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2013.03.017

摘要

目的:探讨survivin抗原肽体外诱导健康人外周血单个核细胞(PBMC)后T淋巴细胞活化情况及TCRVβ表达谱变化.方法:分离健康人PBMC经rhIL-4、rhGM-CSF诱导DCs,将成熟DCs分为阴性组(不负载肽)、未洗脱负载组(负载survivin肽)、洗脱负载组(经酸液洗脱并多聚甲醛固定后负载survivin肽),分别与自体淋巴细胞共培养诱导抗原特异性T淋巴细胞.分别于24小时、48小时、96小时和7天以Elisa法检测诱导后T淋巴细胞中IFN-γ的分泌,并于第7天通过流式细胞仪分析TCRV3表达谱.结果:随着时间延长两实验组IFN-γ的分泌比阴性组显著增高,且洗脱负载组增加更为显著.流式细胞仪分析结果显示洗脱负载组相比于阴性组及未洗脱负载组引起TCR Vβ表达谱的改变更为明显,其中TCR亚家族Vβ7.2、Vβ12、Vβ14、Vβ16、Vβ20、Vβ22最为显著.结论:DCs经酸液洗脱表面多肽并固定的方法更能有效地诱导TCRVβ亚家族优势取用.