糖基因GLT25D2敲除小鼠的制备与基因型鉴定

• 作者: 任慧 刘燃 李红敏 王志强 王晗 郝晓花 陈霖 魏红山 黄玉波
• 来源期刊: 中华实验和临床病毒学杂志
• 关键词: 基因 糖基转移酶类 糖基化 胶原 纤维化 小鼠
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 492-494
• 页数: 3页
• 字数: 1585字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2013.06.032

摘要

目的 建立GLT25 D2基因敲除小鼠模型,为胶原糖基化修饰分子机制研究奠定工作基础.方法 采用胚胎干细胞线性打靶技术,获得同源重组的干细胞,繁殖嵌合体,GLT25 D2+/-小鼠杂交获得GLT25 D2-/-纯合子小鼠.采用PCR技术对小鼠进行基因型鉴定.结果 共获得Founder小鼠4只,其中雄性和雌性各2只.经过8个月的配笼繁殖,共获得GLT25D2-/-小鼠40只;GLT25 D2+/-小鼠89只;GLT25 D2-/-小鼠34只.不同基因型比例符合孟德尔遗传规律.对不同基因型小鼠合笼配对观察发现,GLT25 D2-/-小鼠生育功能下降,每胎数量平均3～4只,显著少于GLT25 D2+/-小鼠之间的每胎小鼠数(平均6～8只).对20,40,以及60 d小鼠的体重观察显示,GLT25 D2-/-小鼠体重显著高于GLT25 D2+/-和GLT25D2+/+型小鼠,但这种体重差异的趋势随小鼠年龄的增加而逐渐减少.结论 GLT25D2基因敲除小鼠发育异常,与野生型小鼠相比,体重增加,繁殖功能降低.