慢病毒介导Vimentin基因沉默抑制胰腺癌细胞侵袭和粘附的机制

• 作者: 朱峰 李旭 江建新 王敏 田锐 申铭 秦仁义
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺癌 波形蛋白 侵袭转移 细胞粘附 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 247-253
• 页数: 7页
• 分类号: R736.7
• 字数: 5547字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2013.03.001

摘要

目的 应用慢病毒介导的shRNA基因沉默技术,有效沉默人胰腺癌细胞株Panc-1中Vimentin表达,并探讨下调Vimentin后对Panc-1细胞侵袭运动及粘附能力的影响及其机制.方法 Lv-VIM-GFP-shRNA慢病毒转染人胰腺癌细胞株Panc-1,Real-time PCR、Western blot和免疫荧光法检测慢病毒转染后Vimentin的沉默效率;Transwell小室体外运动侵袭实验及划痕实验比较细胞运动侵袭能力变化,细胞粘附实验检测细胞粘附能力的变化;Real-time PCR 和Western blot检测肿瘤侵袭和粘附相关因子的表达,免疫荧光法观察转染前后细胞骨架蛋白F-actin和黏着斑激酶FAK的变化.结果 Lv-VIM-GFP-shRNA慢病毒转染Panc-1后能稳定下调其Vimentin的表达(P<0.01).Transwell小室及划痕实验显示,下调Vimentin后能显著抑制Panc-1细胞的侵袭及迁移能力(P<0.01).粘附实验结果显示,粘附30 min后,转染Lv-VIM-GFP-shRNA组较对照组粘附Collagen Ⅳ和FN的细胞数量均减少(P<0.05).下调Vimentin后对肿瘤侵袭及粘附相关因子的mRNA和蛋白水平无明显影响(P>0.05),但能引起细胞骨架F-actin的解聚以及黏着斑激酶FAK的重排.结论 Vimentin基因沉默后可能通过引起F-actin骨架解聚、黏着斑激酶FAK重排来降低细胞与细胞外基质的粘附及细胞运动能力,从而抑制胰腺癌细胞的侵袭和转移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王敏	华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科	297	3374	28.0	48.0
2	江建新	贵阳医学院附属医院肝胆外科	32	94	6.0	8.0
3	朱峰	华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科	62	219	9.0	11.0
4	李旭	华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科	19	82	5.0	8.0
5	申铭	华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科	38	145	8.0	10.0
6	田锐	华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科	29	111	6.0	9.0