牛奶中乳腺上皮细胞的分离培养及鉴定

• 作者: 刘秉春 崔新洁 王婷 王潇 陶林
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 乳汁 牛乳腺上皮细胞 细胞骨架蛋白 泌乳
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 107-113
• 语种: 中文

摘要

旨在建立简便、经济、纯净的牛乳腺上皮细胞的体外培养方法,并对所培养细胞进行鉴定.以新鲜牛奶为材料,离心收集细胞进行原代培养并传代,通过测定生长曲线、乳腺上皮细胞骨架蛋白-角蛋白8和18、β-酪蛋白、核型等对所培养细胞进行鉴定,以确定其为乳腺上皮细胞.离心收集到的细胞原代培养3d后形成多个单克隆,细胞呈典型的铺路石状,同时伴随少量的吞噬细胞,继续培养至单克隆汇合时,细胞表层产生大小不等的乳滴,吞噬细胞大多转移到乳滴中,传代后,得到纯净的乳腺上皮细胞,吞噬细胞随传代而消失；细胞生长曲线呈“S”型,RT-PCR法扩增到了乳腺上皮细胞的骨架蛋白8、18以及β-酪蛋白,细胞免疫组化检测到了细胞角蛋白8,核型为29对端着丝粒常染色体,1对近端着丝粒性染色体.通过以上试验证明,乳汁分离法可以培养纯净的、具有正常分裂增生能力的牛乳腺上皮细胞,建立了乳腺上皮细胞的体外培养模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王潇	内蒙古大学生命科学学院	18	91	6.0	8.0
2	王婷	内蒙古大学生命科学学院	3	10	1.0	3.0
3	崔新洁	内蒙古大学生命科学学院	4	31	3.0	4.0
4	刘秉春	内蒙古大学生命科学学院	4	31	3.0	4.0
5	陶林	内蒙古大学生命科学学院	1	9	1.0	1.0