紫花苜蓿DExD/H box RNA解旋酶基因的克隆与分析

• 作者: 康俊梅 张铁军 杨青川 董宽虎 高燕丽 龙瑞才
• 来源期刊: 草地学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 紫花苜蓿 解旋酶 亚细胞定位 烟草转化
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 581-589
• 页数: 9页
• 分类号: Q943.2
• 字数: 6195字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11733/j.issn.1007-0435.2013.03.026

摘要

基于紫花苜蓿(Medicago sativaL.)盐胁迫抑制消减杂交文库中的一条EST序列,使用RACE技术克隆得到一条1678 bp的cDNA序列.核酸序列分析表明该cDNA序列包含一个1281 bp的最大开放阅读框,编码426个氨基酸,与拟南芥(Arabidopsis thaliana)RNA解旋酶RH15和RH56的氨基酸序列相似性在90％以上,将该基因命名为MsRH(GenBank序列号:JX508648).对此基因编码蛋白进行结构域预测表明其含有明显的DEXDc和HELICc结构域,预测其为DExD/H box RNA解旋酶.洋葱(Allium cepa)表皮细胞亚细胞定位分析表明MsRH定位于细胞核.为进一步研究此基因的功能,构建了MsRH基因的超表达载体pBI-MsRH,使用农杆菌介导法转化烟草(Nicotiana tobacum),筛选得到5株具有卡那霉素抗性再生烟草植株.PCR和RT-PCR检测结果表明MsRH基因成功插入烟草基因组中并表达.使用250mMNaCl处理7d后,转基因烟草中脯氨酸含量低于野生型烟草,而丙二醛和相对电导率则高于野生型烟草.初步试验结果表明转MsRH基因烟草对盐敏感性升高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董宽虎	山西农业大学动物科技学院	298	3054	27.0	39.0
2	张铁军	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	46	389	11.0	17.0
3	杨青川	山西农业大学动物科技学院	112	1931	25.0	39.0
5	康俊梅	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	81	1022	17.0	29.0
6	龙瑞才	重庆大学生命科学院	6	37	3.0	6.0
7	高燕丽	山西农业大学动物科技学院	3	3	1.0	1.0