在线衍生-高效液相色谱法同时测定血浆中的色氨酸及其代谢物

• 作者: 丁敏 冯成亚 朱明松 杨香春 樊子勉 甄乾娜 高洁莹
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 高效液相色谱法 色氨酸 犬尿氨酸 5-羟吲哚乙酸 犬尿喹啉酸 血浆
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 577-581
• 页数: 5页
• 分类号: O658
• 字数: 3504字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1123.2013.01054

摘要

建立了醋酸锌在线衍生高效液相色谱法同时测定血浆中色氨酸(Trp)、犬尿氨酸(Kyn)、5-羟吲哚乙酸(5-H iaa)和犬尿喹啉酸(Kyna)的方法.以3-硝基酪氨酸为内标(IS),采用Hypersil C-18柱(250 mm×4.0 mm,5μm),以250 mmol/L醋酸锌溶液(pH 5.5)-乙腈(95∶5,v/v)为流动相,流速为0.8 mL/min,柱温30℃.荧光检测波长设定:5-Hiaa为278 nm(λex)/343 nm(λem),Kyna为244 nm(λex)/400 nm(λem);紫外检测波长设定:Kyn和IS为360 nm,Trp为302 nm.4种物质的回收率在91.62％～114.17％之间;线性范围分别为2.50 ～ 320.00μmol/L(Trp),0.32～15.36 μmol/L(Kyn),3.27 ～ 104.60 nmol/L(5-Hiaa),14.00 ～ 464.80 nmol/L(Kyna);检出限分别为0.078 μmol/L(Trp),0.056 μmol/L(Kyn),0.690 nmol/L(5-Hiaa),1.290 nmol/L(Kyna).利用该方法对30例正常孕妇和28例女性健康志愿者的血浆进行测定,结果表明两组间Trp,Kyn和Kyna含量有显著性差异.该方法操作简便,重复性好,灵敏度高,适合于临床检测.