利用离心沉淀法移植恒河猴血管内皮细胞替代角膜内皮的可行性分析

• 作者: 刘海 孙晓梅 朱勤 胡敏 胡竹林
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: 离心沉淀法 角膜内皮移植 恒河猴
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 405-409
• 页数: 5页
• 字数: 5332字
• 语种: 中文

摘要

目的 分析利用离心沉淀法移植体外培养的恒河猴血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VEC)替代角膜内皮细胞(corneal endothelial cells,CEC)的可行性.方法 将恒河猴9只随机分为2组:实验组(6只)、对照组(3只).实验组:角膜环钻取下中央角膜组织,显微镜下撕除后弹力层,将角膜植片形成约45°倾斜、内表面向上方置于0.6 mL EP管中,再向管中加入配置好的密度为40×106L-1的恒河猴VEC悬液0.5 mL,管中形成棉球在下、角膜植片在中间、细胞悬液在上面的三明治结构,盖紧EP管,放置于离心机中,以400r·min-1、800 r· min-1、1200 r·min-1的转速各离心4 min后将植片原位缝回植床；对照组:将撕除后弹力层的术眼角膜植片原位缝回植床.术后1个月、2个月、3个月分别摘取术眼,行扫描电镜观察移植的VEC在角膜植片内表面的分布情况.结果 离心沉淀后倒置显微镜观察,可见移植的类圆形细胞均匀贴附于角膜植片内表面；术后1个月扫描电镜显示种植的VEC贴附于角膜内表面,细胞表面积较大,呈长梭形,细胞间连接不紧密,可见细胞间隙及少量裸露的胶原纤维区；随着时间推移,术后2个月时,可见植片内表面的VEC密度逐渐增大,细胞间出现紧密连接；术后3个月时,可见细胞密度进一步增大,大片状均匀贴附于角膜植片内表面,细胞呈不规则多边形,高倍镜下,细胞表面可见典型的长短不一微绒毛.对照组未见纤维裸露区,胶原前表面偶见白细胞及变形红细胞.结论 离心沉淀法可以将VEC成功移植于角膜内表面并均匀分布,移植后的VEC可异位生长并大量分裂增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙晓梅	中国医学科学院昆明医学生物研究所灵长类研究中心	51	288	11.0	13.0