改良揭膜消化法分离培养恒河猴角膜内皮细胞

• 作者: 孙晓梅 李妍 胡竹林 马瑞杰
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 角膜内皮细胞 改良揭膜消化法 体外培养 恒河猴
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 618-621
• 页数: 4页
• 分类号: R772.2
• 字数: 4516字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13389/j.cnki.rao.2016.0164

摘要

目的 分析改良揭膜消化法分离培养恒河猴角膜内皮细胞的可行性.方法 揭取恒河猴角膜后弹力层和内皮层,反复剪碎,用1 mg·mL-1胶原酶A消化15 min,离心后重悬接种.待原代细胞长满80％～90％时,以40×106个·L-1的密度传代.观察记录原代及传代细胞生长情况、传代时间,进行细胞鉴定,并与组织贴壁法相比较.结果 改良揭膜消化法获取的原代细胞生长较慢,21 d融合成单层铺路石样结构,无基质细胞污染;传代细胞生长较快,5～6d可传一代;神经元特异烯醇化酶表达阳性.组织贴壁法分离组织24h后组织片体积变小,透亮度明显下降,疑似溶解,高倍镜下观察显示,后弹力层纤维排列紊乱,细胞观察不清;继续培养至第5天,细胞完全溶解,组织片碎裂,轮廓不清,未见角膜内皮细胞爬出.结论 改良揭膜消化法能简易高效地获得大量恒河猴角膜内皮细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙晓梅	中国医学科学院昆明医学生物研究所灵长类研究中心	51	288	11.0	13.0
2	胡竹林	云南省第二人民医院眼科中心	83	231	8.0	10.0
3	李妍	云南省第二人民医院眼科中心	30	63	4.0	7.0
4	马瑞杰	云南省第二人民医院眼科中心	2	1	1.0	1.0