制备可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ-脂联素球部融合蛋白的两种细胞培养工艺比较

• 作者: 吕建新 尹玉婷 熊春晖 王彩虹 高基民 黄世高
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ-脂联素球部融合蛋白 生物反应器 CHO细胞 真核表达
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 生物育种与工艺优化
• 页码范围: 115-118
• 语种: 中文

摘要

利用7.5 L生物反应器篮式贴壁培养和全悬浮批式培养CHO工程细胞株表达可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ-脂联素球部(sTNFRⅡ-gAD)融合蛋白,比较这两种培养方法的产率,以便优化高效表达sTNFRⅡ-gAD融合蛋白的制备工艺.篮式贴壁培养首先小规模培养CHO工程细胞株,待细胞增殖到一定密度后以3× 105～4× 105 cells/mL密度接种生物反应器贴壁培养3d,调换成不含血清的LK021培养基继续培养4d.而全悬浮无血清批式培养则以3×105～4×105 cells/mL密度的CHO工程细胞株接种于生物反应器,连续培养7d.培养过程实时监测培养条件,维持pH和DO的稳定.分别收集细胞上清,离心去细胞后用Pellicon切相流超滤系统对蛋白进行浓缩,并通过DEAE离子交换柱进行纯化.结果显示,篮式贴壁培养和全悬浮批式培养均成功表达了sTNFRⅡ-gAD融合蛋白,产量分别为8.0 mg/L和7.5 mg/L、纯度分别为95％和98％,从而为sTNFRⅡ-gAD融合蛋白的中试工艺研究提供了一定的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕建新	温州医学院浙江省模式生物技术与应用重点实验室	153	1535	21.0	32.0
2	王彩虹	温州医学院浙江省模式生物技术与应用重点实验室	8	36	3.0	6.0
3	高基民	温州医学院浙江省模式生物技术与应用重点实验室	17	32	3.0	4.0
4	黄世高	温州医学院浙江省模式生物技术与应用重点实验室	1	0	0.0	0.0
5	尹玉婷	温州医学院浙江省模式生物技术与应用重点实验室	1	0	0.0	0.0
6	熊春晖	温州医学院浙江省模式生物技术与应用重点实验室	1	0	0.0	0.0