病毒基因组耦联报告基因用于筛选适宜丙型肝炎病毒培养的亚细胞克隆株

• 作者: 向昊 吴忠香 吴文龙 姚宇峰 寸韡 张智辉 张雪梅 徐婧雯 王晓辉
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 丙型肝炎病毒 细胞培养 报告基因 超感染
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 161-167
• 页数: 7页
• 字数: 7311字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2013.03.001

摘要

目的 快捷筛选到适合丙型肝炎病毒(HCV)培养的细胞系.方法 将荧光素酶报告基因耦联到JFHlHCV基因组中,检测了多个人肝细胞系对HCV的易感性,进一步利用耦联荧光素酶的HCV复制子模型筛选并经过IFN-α处理更适宜HCV培养的Huh7亚细胞克隆株.结果 实验结果显示BEL7402、BEL7404、QSG7701、SMMC7721、QGY7701、QGY7703和HepG等肝细胞均不易感染HCV,仅限于Huh7细胞能被HCV感染.同时实验获得了更适宜HCV培养的Huh7亚细胞克隆株——Huh7G3.结论 在利用IFN-α处理细胞的过程中,通过检测荧光素酶活性,显示IFN-α对HCV亚基因组的复制抑制效果具有剂量依赖效应,研究同时显示:HCV复制子细胞能否抵抗HCV的超感染依赖于细胞内是否存在HCV RNA复制而不是其复制水平的高低.