用BrdU标记滞留细胞联合Sox2表达检测晶状体干细胞

• 作者: 周健 王潆
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: 晶状体干细胞 BrdU Sox2 标记滞留细胞
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 505-508,512
• 页数: 5页
• 字数: 4686字
• 语种: 中文

摘要

目的 检测小鼠晶状体上皮细胞中可能存在的晶状体干细胞及其分布位置.方法 60只(60眼)Balb/c小鼠随机分为BrdU标记组和生理盐水对照组,每组各30只(30眼).BrdU标记组以150mg· kg-1剂量的10g·L-1BrdU每天2次腹腔注射,连续注射10 d.生理盐水对照组以15 mL·kg-1生理盐水每天2次腹腔注射,连续注射10d.在BrdU或生理盐水注射结束后0周、1周、2周、3周、4周、6周、8周、10周、12和14周分别处死3只小鼠,制备眼球冰冻切片.通过免疫荧光化学染色观察晶状体上皮BrdU标记细胞的量和分布变化.在BrdU标记组,通过免疫荧光化学染色观察0周、4周、8周、12和14周晶状体上皮细胞Sox2蛋白的表达及分布规律.通过BrdU-Sox2双标记免疫荧光染色观察BrdU-Sox2双标阳性细胞.结果 BrdU标记组在完成BrdU标记时(0周),晶状体上皮中央区和赤道区BrdU标记率均达100％；随着时间延长,中央区和赤道区的BrdU标记率逐渐下降,至12周时降至最低,中央区和赤道区分别为14.23％、5.86％ (P=0.000)；14周时中央区和赤道区分别为14.97％、6.11％(P=0.000),分别与12周时两区比较,差异均无统计学意义(均为p＞0.05).0周、4周、8周、12周和14周时,中央区Sox2阳性细胞率分别为3.74％、3.47％、4.23％、4.09％和3.70％,赤道区Sox2阳性细胞率分别为0.66％、0.37％、0.47％、0.33％和0.51％,各时间点中央区与赤道区Sox2阳性细胞率差异均无统计学意义(均为P＞0.05).Sox2在晶状体上皮细胞内表达稳定,主要分布于中央区.部分BrdU阳性细胞表达Sox2,即BrdU-Sox2双标阳性细胞,集中分布于晶状体上皮中央区.结论 表达Sox2的标记滞留细胞可能是晶状体干细胞,主要分布于晶状体上皮中央区.