罗非鱼无乳链球菌DNA疫苗的构建及免疫效果研究

• 作者: 吴灶和 汤菊芬 王蓓 简纪常 蔡双虎 黄郁葱
• 来源期刊: 中国海洋大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 无乳链球菌 免疫 罗非鱼 重组DNA疫苗
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 30-35
• 页数: 6页
• 分类号: S941.42
• 字数: 5085字
• 语种: 中文

摘要

为研究罗非鱼源无乳链球菌重组DNA疫苗对鱼体的免疫保护作用,将Sip基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)构建重组质粒pcDNA-Sip,并以肌肉注射方式免疫吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus).免疫后第7、28天取样,采用PCR及RT-PCR方法检测pcDNA-Sip在各个组织(包括肌肉、脾脏、头肾、鳃及肝脏)中的表达情况;分别于免疫后第7、14、21、28天采集血清,使用ELISA方法检测抗体效价;免疫28 d后进行攻毒实验,计算疫苗的免疫保护率.结果表明,重组质粒pcDNA-Sip可以在上述各组织中被检测到;免疫21 d后抗体效价出现峰值达1∶5 120;免疫保护率为90％.由此证实,pcDNA-Sip重组质粒可以转染到罗非鱼组织细胞,并可在鱼体中持续表达,同时有较高的免疫保护率.