Nrf2过表达对乙醇刺激下肝星状细胞激活与增殖及合成Ⅰ型胶原的影响

• 作者: 何月 刘曼 张吉翔
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝纤维化 肝星状细胞 核因子E2相关因子2 Ⅰ型胶原 α-平滑肌肌动蛋白
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1590-1596
• 页数: 7页
• 分类号: R365|R575.2
• 字数: 4653字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2013.09.009

摘要

目的:探讨核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)过表达对乙醇诱导下大鼠肝星状细胞系HSC-T6激活与增殖及Ⅰ型胶原mRNA及蛋白表达水平的影响.方法:采用脂质体介导法对HSC-T6 进行pEGFP-Nrf2重组质粒及pEGFP-N1空载质粒瞬时转染,将细胞分为正常对照组、乙醇刺激组、乙醇刺激+pEG-FP-Nrf2质粒组和乙醇刺激+ pEGFP-N1空载质粒组.采用RT-PCR及Western blotting方法对HSC-T6中Nrf2、Ⅰ型胶原及α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA) mRNA及蛋白表达水平进行检测,采用MTT法对HSC-T6细胞增殖水平进行检测,采用流式细胞术对HSC-T6细胞周期分布进行检测.结果:(1)荧光显微镜下观察显示pEGFP-Nrf2质粒成功转染HSC-T6,转染后48h Nrf2 mRNA及蛋白表达水平较其余组显著升高(P＜0.05).(2)乙醇束激组与乙醇刺激+ pEGFP-N1空载质粒组之间细胞增殖水平、Ⅰ型胶原、α-SMA mRNA及蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞o.05),均明显高于正常对照组(P＜0.05),细胞周期分布G1期比例下降,S期比例升高(P＜0.05),而乙醇刺激+pEGFP-Nrf2质粒组细胞增殖水平及Ⅰ型胶原、α-SMA mRNA及蛋白表达水平与乙醇刺激组及乙醇刺激+ pEGFP-N1空载质粒组相比均显著下降(P＜0.05),细胞周期分布G1期比例显著上升,S期比例显著下降(P＜0.05),呈G1/S期阻滞.结论:Nrf2过表达可显著抑制乙醇对HSC-T6Ⅰ型胶原及α-SMA mRNA及蛋白表达的促进作用,使HSC-T6细胞周期发生G1/S期阻滞,抑制乙醇诱导的HSC-T6增殖水平的升高,提示其对乙醇诱导的HSC-T6细胞活化具有负性调控作用.