靶向Nrf2基因shRNA慢病毒载体的构建及其对肝星状细胞Nrf2基因表达的沉默

• 作者: 刘震雄 张哲 张明鑫 李菁华 王景杰 赵曙光 闻勤生
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: Nrf2 短发夹状RNA 慢病毒载体 HSC-T6
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1119-1123,1231
• 页数: 6页
• 分类号: R575.5
• 字数: 3575字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2014.12.001

摘要

目的 设计以NF-E2-related factor2(Nrf2)基因为靶点的短发夹状RNA (shRNA),构建重组慢病毒表达载体并转染大鼠肝星状细胞株HSC-T6,观察其对Nrf2表达的影响. 方法 应用重组DNA技术,将设计好的4条基因特异性shRNA序列插至慢病毒表达载体pGLV3-GFP中,构建pGLV3-GFP-Nrf2-shRNA-1/2/3/4,并应用脂质体法转染293T细胞,进行病毒包装及滴度测定.采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)及Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测转染72 h和96 h后大鼠肝星状细胞株HSC-T6 Nrf2基因的表达情况. 结果 测序证实慢病毒载体构建成功,并测定滴度为1×109 TU/ml,pGLV3-GFP-Nrf2-shRNA转染后72 h和96 h可抑制Nrf2基因mRNA及蛋白的表达. 结论 成功构建Nrf2基因的shRNA慢病毒载体,可有效抑制大鼠肝星状细胞株HSC-T6中Nrf2基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王景杰	第四军医大学消化内科	217	1896	21.0	31.0
2	张明鑫	第四军医大学消化内科	38	128	6.0	9.0
3	赵曙光	第四军医大学消化内科	89	638	15.0	20.0
4	闻勤生	第四军医大学消化内科	119	905	15.0	22.0
5	刘震雄	第四军医大学消化内科	62	491	12.0	18.0
6	张哲	第四军医大学消化内科	14	60	5.0	7.0
7	李菁华	第四军医大学消化内科	2	1	1.0	1.0