Nrf2点突变稳转肺癌细胞株构建及鉴定

• 作者: 张琳琳 贾维 郑翠侠
• 来源期刊: 吉林中医药
• 学科: 医学
• 关键词: Nrf2 点突变 肺癌 逆病毒载体
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1053-1056
• 页数: 4页
• 分类号: R273|R374.2
• 字数: 2691字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13463/j.cnki.jlzyy.2020.08.023

摘要

目的 构建核转录因子Nrf2(nuclear factor erythroid 2 related factor 2,Nrf2)点突变逆病毒稳转细胞株,并检测其在A549人肺癌细胞中的表达效果,为基因靶向治疗提供研究基础.方法 针对人Nrf2基因序列,扩增目的片段并与Teasy载体连接,构建Nrf2-Teasy重组质粒,用Fast Mutagenesis System对Nrf2进行定点诱变,使其第2号外显子有T35C和G37A的点突变.并将突变的Nrf2片段插入逆病毒载体pMSCV,构建pMSCV-MUT-Nrf2重组质粒.利用逆病毒系统将其稳转入A549肺癌细胞,运用RT-PCR技术检测Nrf2 mRNA表达水平.结果 稳转后的A549目的细胞可观察到荧光,且其Nrf2 mRNA表达水平较未转染细胞显著增高.结论 成功构建点突变的逆病毒质粒,并有效感染目的细胞,为进一步研究Nrf2基因突变在肺癌中的作用提供细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾维		5	5	1.0	2.0
2	张琳琳		5	19	1.0	4.0
3	郑翠侠		1	0	0.0	0.0