靶向MAG基因shRNA慢病毒载体的构建及其对MAG基因表达的沉默

• 作者: 何志威 刘安民 李方成 罗铭 蔡望青 陈舒
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 短发夹状RNA 髓鞘相关糖蛋白 慢病毒
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 1725-1728
• 页数: 4页
• 分类号: R737.25
• 字数: 3354字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2013.09.034

摘要

目的:设计以MAG基因为靶点的短发夹状RNA(shRNA),构建重组慢病毒载体并鉴定此RNA干扰体系对MAG基因表达的影响.方法:将3条靶向大鼠MAG基因的shRNA片段插入至慢病毒载体pWPI,与pCDNA3-MAG-FLAG质粒用Lipofectamine 2000共转染293T细胞,Western blotting法鉴定出最有效的shRNA.此重组质粒与pAX2和pMD2G经293T细胞包装后,产生的重组慢病毒感染少突胶质细胞,48 h后Western blotting法检测MAG蛋白的表达情况.结果:经双酶切后测序鉴定,构建了MAG shRNA慢病毒载体pWPI-MAG,鉴定出shRNA-2为最为有效的shRNA.重组慢病毒能明显抑制少突胶质细胞中MAG的表达.结论:慢病毒介导的shRNA 干扰技术可特异性阻断MAG的表达,为进一步探讨MAG特异性shRNA治疗神经系统髓鞘损伤奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗铭	中山大学孙逸仙纪念医院肿瘤科	27	87	6.0	7.0
2	刘安民	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	41	194	8.0	12.0
3	李方成	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	42	199	8.0	11.0
4	蔡望青	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	31	170	7.0	12.0
5	陈舒	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	6	8	2.0	2.0
6	何志威		1	4	1.0	1.0