外源性miR-34a抑制H1299细胞生长的机制研究

• 作者: 周新文 张燕娟 段卫明 段广新 许雅香
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: miR-34a 凋亡 衰老 E2F3
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 637-642
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

将合成的miR-34a成熟序列转染p53-/-的非小细胞肺癌H1299细胞,探究外源性的miR-34a是否影响p53缺失细胞的生长、凋亡和衰老以及其作用机制.MTT检测细胞的生长与存活,藻红B染色检测细胞的死亡,Annexin V/PI染色检测细胞凋亡,β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞的衰老,Western blot检测与细胞凋亡和周期相关的Bcl-2、Puma、Cdk4和E2F3蛋白的表达.结果显示,miR-34a转染组和阴性对照组相比,存活率明显降低,且48 h较24 h更显著,24 h和48 h存活率分别为79.94％、64.83％;细胞死亡和凋亡的分析结果表明,外源性miR-34a可以促进细胞死亡和凋亡；此外,细胞还出现了明显的衰老,并且检测到凋亡、衰老相关的Bcl-2、Puma、E2F3和Cdk4蛋白的表达下调.miR-34a可以下调p53下游相应靶蛋白的表达,通过部分补救p53通路或p53非依赖途径促进细胞的凋亡、衰老并抑制细胞的增殖.