靶向FHL1的microRNA初步筛选研究

• 作者: 付洁 叶棋浓 宋海峰 徐小洁 王瑜 程龙
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: FHL1基因 荧光素酶报告基因 转录活性 3'-UTR区 microRNA
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 423-426
• 页数: 4页
• 分类号: R730.59
• 字数: 3353字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2013.06.008

摘要

目的 构建含有FHL1基因3'-UTR区的荧光素酶报告基因载体,用以检测与其相互作用的microRNA(miRNA).方法 PCR扩增出FHL1基因3'-UTR区片段,插入到经过改造的荧光素酶报告基因载体pcDNA 3.0中；利用Target Scan5.1软件预测可能与FHL1基因3'UTR区相互作用的miRNA,将miRNA与荧光素酶报告重组子共转染至293T细胞中,检测其荧光活性；构建针对荧光活性结果变化明显的miRNA的种子区缺失突变体,检测荧光活性.结果 测序结果表明,含有FHL1基因3'-UTR区的荧光素酶报告基因载体构建正确；荧光素酶活性实验表明,与对照组相比,miR-200c、miR-146a、miR-146b-5p可使荧光素酶报告重组子的荧光素酶活性降低40％左右,并构建上述miRNA缺失突变体,miR-200c使荧光素酶活性回复.结论 成功构建了FHL1基因3'UTR区的荧光素酶报告基因载体,而miR-200c、miR-146a、miR-146b-5p可以抑制其荧光素酶活性,其中miR-200c可能直接作用于FHL1基因3'-UTR区.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋海峰	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	66	327	9.0	15.0
2	叶棋浓	军事医学科学院生物工程研究所	138	519	11.0	17.0
3	徐小洁	军事医学科学院生物工程研究所	51	112	6.0	7.0
4	付洁	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	17	39	3.0	5.0
5	程龙	军事医学科学院生物工程研究所	26	79	4.0	8.0
6	王瑜		4	4	2.0	2.0