靶向RhoA基因的shRNA对卵巢上皮性癌裸鼠移植瘤的影响及作用机制

• 作者: 周聪 康佳丽 杨文娟 王小霞 聂妙玲 蒋文燕
• 来源期刊: 中华妇产科杂志
• 关键词: 卵巢肿瘤 异种移植模型抗肿瘤试验 ρA GTP结合蛋白质 RNA,小分子干扰 基因疗法
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 778-783
• 页数: 6页
• 字数: 5558字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2013.10.013

摘要

目的 探讨靶向RhoA基因的短发夹状RNA(shRNA)对卵巢上皮性癌(卵巢癌)裸鼠移植瘤的影响及可能的抗肿瘤作用机制.方法 建立卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,应用随机数字表法将荷瘤裸鼠随机分为3组,即实验组(予携带靶向RhoA基因的shRNA慢病毒液治疗)、阴性对照组(予携带针对随机无关序列的shRNA慢病毒液治疗)、空白对照组(予磷酸盐缓冲液),比较3组裸鼠的移植瘤生长情况,包括移植瘤生长速度、肿瘤体积、肿瘤质量；光镜下观察3组裸鼠移植瘤及主要器官组织的病理形态学特征.采用实时荧光定量PCR技术、免疫组化SP法和蛋白印迹法检测移植瘤组织中RhoA mRNA和蛋白的表达；脱氧核苷酸末端转移酶介导的核苷酸缺口末端标记(TUNEL)法检测3组裸鼠移植瘤细胞的凋亡情况[以凋亡指数(AI)表示].结果 (1)自治疗开始的第9天起,实验组裸鼠移植瘤的生长速度滞后于阴性对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01).治疗结束后10d,实验组裸鼠的移植瘤体积为(338±114) mm3,小于阴性对照组和空白对照组[分别为(1190 ±332)和(1101±396) mm3],分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01)；实验组裸鼠平均肿瘤质量为(0.23 ±0.11)g,低于阴性对照组和空白对照组[分别为(0.79 ±0.19)、(0.74±0.17)g],分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).而阴性对照组裸鼠移植瘤的生长速度、移植瘤体积、肿瘤质量分别与空白对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).光镜下观察,实验组肿瘤细胞呈大片坏死区域且核同缩多见,而阴性对照组和空白对照组肿瘤细胞无明显变化.(2)实验组裸鼠移植瘤组织中,RhoA mRNA的表达水平为0.30±0.05,低于阴性对照组的0.95±0.06和空白对照组的1.00±0.11,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01)；RhoA蛋白的表达水平为0.14±0.06,低于阴性对照组的0.78±0.14和空白对照组的0.75 ±0.13,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01)；实验组肿瘤细胞的AI为(20.9±3.4)％,高于阴性对照组的(5.2±2.0)％和空白对照组的(6.0±2.1)％,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).而阴性对照组裸鼠移植瘤组织中RhoA mRNA和蛋白的表达水平及AI分别与空白对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 靶向RhoA基因的shRNA在体内有效下调卵巢癌裸鼠皮下移植瘤组织中RhoA基因的表达,抑制卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长,其机制可能与促进细胞凋亡有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	康佳丽	广州医学院附属广州市第一人民医院妇产科	34	237	8.0	14.0
2	王小霞	广州医学院附属广州市第一人民医院妇产科	19	126	6.0	10.0
3	蒋文燕	广州医学院附属广州市第一人民医院妇产科	2	3	1.0	1.0
4	杨文娟	广州医学院附属广州市第一人民医院妇产科	6	24	3.0	4.0
5	聂妙玲	广州医学院附属广州市第一人民医院妇产科	9	33	3.0	5.0
6	周聪	广州医学院附属广州市第一人民医院妇产科	2	3	1.0	1.0