超低温冷冻过程引起猪精子产生“似凋亡”变化

• 作者: 李新红 王亮亮 甄林青 胡启蒙 赵娜
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 低温保存 似凋亡 线粒体膜电位 精子 猪
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1766-1774
• 页数: 9页
• 分类号: S828|S814.8
• 字数: 6550字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2013.11.010

摘要

测定超低温冷冻保存过程能否诱导猪冻融精子产生“似凋亡”变化,探讨猪冻融精子活力降低的分子机理.利用Annexin-V/PI及JC-1荧光抗体试剂盒与流式细胞术相结合的方法,检测猪精子冷冻前后及不同培养时间冻融精子质膜中磷脂酰丝氨酸(PS)位置及线粒体膜电位(△ψm)变化;蛋白免疫印迹分析方法测定猪精子Bcl-2、Caspase-9及Caspase-3等“凋亡”因子含量变化.猪精子超低温冷冻保存后活性精子的比例(54.4％)显著低于鲜精组(87.9％)(P＜0.05),其中PS移位的精子“似凋亡”比例约为26.8％,同鲜精组(5.6％)相比增加21.2个百分点(P＜0.05);降温平衡及冷冻复苏后猪精子线粒体膜电位变化显著,其中低△ψm精子比例显著增加(P＜0.05);同新鲜精子(19.6％)相比,冷冻复苏后(79.4％)低△ψm精子比例提高59.8个百分点(P＜0.05);冻融精子中Bcl 2、Caspase-9及Caspase-3等凋亡因子活性显著高于鲜精子及降温平衡后的精子(P＜0.05),由此证明冻融过程能诱导猪精子进入凋亡状态.超低温冷冻保存能导致猪冻融精子质膜磷脂酰丝氨酸(PS)移位及线粒体膜电位降低,同时激发精子Bcl-2、Caspase-9及Caspase-3等凋亡因子活性,诱导成活冻融精子提前进入“似凋亡”状态,明显缩短冻融精子存活时间,这可能是猪冻精繁殖力降低的又一诱因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李新红	上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室	24	172	9.0	12.0
2	赵娜	上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室	7	15	2.0	3.0
3	甄林青	上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室	6	11	2.0	3.0
4	王亮亮	上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室	6	10	2.0	3.0
5	胡启蒙	上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室	6	21	3.0	4.0