mRNA氧化损伤检测方法的优化及p53 mRNA氧化损伤分析

• 作者: 丁勇 付汉江 刘斌 朱捷 邢瑞云 郑晓飞 铁轶 马春花
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA 氧化损伤 p53 mRNA
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 180-183,200
• 页数: 5页
• 分类号: Q522
• 字数: 3661字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2013.03.005

摘要

目的 建立并优化检测真核细胞mRNA氧化损伤的方法——反转录阻断-双引物扩增法,检测p53 mRNA氧化损伤.方法 建立非细胞体系和细胞体系mRNA氧化损伤模型,提取RNA并反转录成cDNA,根据所检测mRNA的5’端和3’端各设计一对引物,以cDNA为模板进行实时定量PCR.结果 非细胞体系和细胞体系氧化处理组GAPDH和p53 mRNA的氧化损伤程度均明显高于对照组,且随着过氧化氢浓度增加RNA氧化损伤增强；同时一定限度内降低反转录酶用量能提高检测灵敏度.结论 本研究建立并优化的RNA氧化损伤检测方法能检测特定mRNA对氧化的敏感性及损伤程度,为分析相关疾病造成的RNA氧化损伤以及探索其发病机制和治疗方法提供了技术支持.