大鼠骨髓间充质干细胞体外培养及CM-DiI标记的实验研究

• 作者: 徐青 李劳冬 李洁 毛雨红 王孝养 莫碧文 韦江红 黄剑伟
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 原代培养 CM-DiI 细胞标记
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 607-611
• 页数: 5页
• 分类号: R457.7
• 字数: 4044字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外分离纯化、扩增以及标记的方法,为后期体内实验提供依据.方法 采用全骨髓培养和差速贴壁法分离纯化MSCs,培养期间观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期和表面标记物,成脂成骨分化诱导鉴定.MSCs经氯甲基苯甲酰氨荧光染料(CM-DiI)标记后,荧光显微镜观察荧光标记情况,流式细胞仪检测标记率,并通过绘制生长曲线明确CM-DiI对MSCs生长增殖的影响.结果 MSCs接种24~48 h后,贴壁细胞多为圆形、多角形、梭形,传至第3代时形态呈均一的长梭形.第3代MSCs高表达CD44,低表达CD106,不表达CD11b、CD45,85%以上细胞处于G0/G1期;成脂成骨诱导分别经油红O和茜素红染色均呈阳性.CM-DiI标记后荧光显微镜下细胞呈红色荧光,体外培养2周荧光未见明显减弱;流式细胞术检测显示标记率达95%以上,标记后细胞生长增殖不受影响.结论 通过全骨髓贴壁法及其扩增后可获得大量纯度较高的间充质干细胞,CM-DiI标记是一种简单、稳定、无毒的细胞标记方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	莫碧文	桂林医学院附属医院呼吸内科	106	588	13.0	17.0
2	韦江红	桂林医学院附属医院呼吸内科	28	119	7.0	9.0
3	李劳冬	桂林医学院附属医院呼吸内科	6	32	5.0	5.0
4	黄剑伟	桂林医学院附属医院呼吸内科	15	89	7.0	8.0
5	徐青	桂林医学院附属医院呼吸内科	9	42	4.0	6.0
6	李洁	桂林医学院附属医院呼吸内科	4	13	2.0	3.0
7	毛雨红	桂林医学院附属医院呼吸内科	1	5	1.0	1.0