Hc38基因沉默对捻转血矛线虫L3期幼虫发育的影响

• 作者: 何延华 康立超 张兴亚 张平 王新华 薄新文 陈南颖 韩猛立 黄新
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 捻转血矛线虫 Hc38基因 RNA干扰 发育
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 19-26
• 页数: 8页
• 分类号: S855.9
• 字数: 6214字
• 语种: 中文

摘要

通过研究Hc38基因对捻转血矛线虫L3期幼虫发育的影响,探索Hc38基因功能,为利用该基因防治捻转血矛线虫的进一步研究提供依据.针对Hc38基因序列设计并合成特异性dsRNA和siRNA,采用浸泡的方法对捻转血矛线虫L3期幼虫进行RNA干扰(RNAi)试验,利用实时荧光定量PCR分析Hc38基因在L3期幼虫中的转录抑制效果,同时将dsRNA和siRNA浸泡24 h后的L3期幼虫感染绵羊,研究Hc38基因的沉默对捻转血矛线虫L3期幼虫在绵羊体内发育的影响,定期采集绵羊粪便检查虫卵数,30 d后剖检绵羊皱胃,检查荷虫数的变化.实时荧光定量PCR检测表明,各试验组Hc38基因的相对含量显著低于对照组(P＜0.01),浸泡72 h后,Hc38-dsRNA组和Hc38-siRNA组Hc38基因的表达量分别仅为对照组的32.27％和14.93％.绵羊体内干扰沉默效果显示,试验组Hc38干扰组虫卵减少率最高,为50％,减虫率最高,为48.6％.通过浸泡法导入的dsRNA和siRNA均能有效抑制Hc38基因的转录,同时Hc38基因的沉默与幼虫的发育密切相关,为捻转血矛线虫及其他寄生线虫的基因功能研究提供一种新的方法.