乙型肝炎病毒X蛋白抑制SFRP5启动子的活性

• 作者: 单晓亮 周帆 唐霓 权会琴 聂丹 谢青 陈庆美 陈林林
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒X蛋白 分泌型卷曲相关蛋白5 启动子区
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 200-204
• 页数: 5页
• 分类号: R373.21|R394.3
• 字数: 3023字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2013.02.002

摘要

目的:探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)抑制分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)启动子活性的分子机制.方法:扩增不同长度的SFRP5启动子区片段,构建到萤光素酶报告基因载体pGL3-Basic上,并将构建好的重组质粒转染入正常肝细胞系LO2细胞,再分别感染编码HBx的腺病毒(Ad-HBx)或编码绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-GFP),荧光显微镜下观察病毒感染效率,检测萤光素酶活性以观察HBx对SFRP5启动子活性的影响.结果:(1) 含不同长度的SFRP5启动子区截短突变报告质粒构建成功.(2) 截短突变报告质粒的萤光素酶活性与pGL3-Basic对照组相比,分别为(6.32±0.04)倍(-478 bp~+47 bp)、(5.79±0.32)倍(-811 bp~+47 bp)、(3.59±0.34)倍(-1 235 bp~+47 bp)、(3.86±0.39)倍(-1 677 bp~+47 bp)、(3.26±0.42)倍(-2 072 bp~+47 bp) (均P<0.05).过表达HBx可以明显抑制SFRP5启动子活性,抑制率分别为44%(-478 bp~+47 bp) (P<0.05)、46%(-811 bp~+47 bp) (P<0.05)、28%(-1 235 bp~+47 bp)、24%(-1 677 bp~+47 bp)和40%(-2 072 bp~+47 bp).结论:HBx可以明显抑制SFRP5启动子区活性,可能导致SFRP5基因表达下调.