乙型肝炎病毒X蛋白上调S100钙结合蛋白A11基因启动子表达活性研究

• 作者: 刘妍 成军 杨倩 洪源 王建军
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 启动子 反式激活
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 377-379
• 页数: 3页
• 分类号: R512.63
• 字数: 2399字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2004.05.002

摘要

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBV-X蛋白)对S100钙结合蛋白A11(calgizzarin S100A11)启动子转录的激活作用.方法以解放军第302医院基因治疗研究中心自行构建的HBV-X蛋白反式调节基因的cDNA文库抑制性消减杂交(SSH)技术的筛选结果及基因表达谱芯片结果为基础,利用生物信息学技术确定S100A11的启动子区域(S100A11-p),聚合酶链反应(PCR)扩增S100A11-p,克隆至真核报告载体pCAT3中,构建pCAT3-S100-p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性;并与pcDNA3.1(-)-X共转染HepG2细胞系,用ELISA法检测CAT的表达活性.结果 pCAT3-S100-p在HepG2细胞中能够指导CAT的表达;共转染实验中pCAT3-S100-p+pcDNA3.1(-)-X组CAT的表达活性是pCAT3-S100-p的2.1倍.结论所克隆的S100A11启动子有顺式激活下游基因的活性作用;HBV的X蛋白具有对S100A11的反式激活作用.本实验进一步验证了解放军第302医院基因治疗研究中心利用SSH技术及基因表达谱技术研究HBV-X蛋白反式激活作用的结果.