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牙龈卟啉单胞菌FtsZ的C末端和N末端氨基酸残基缺失对其GTPase活性的影响
牙龈卟啉单胞菌FtsZ的C末端和N末端氨基酸残基缺失对其GTPase活性的影响
作者:
于维先
刘歆婵
张玉凤
王闻天
高爱超
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
牙龈卟啉单胞菌
丝状温度敏感蛋白质Z
N末端
C末端
GTPase活性
Ca2+阳离子
摘要:
目的:探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)丝状温度敏感蛋白质(FtsZ)的C末端和N末端氨基酸残基缺失对其GTPase活性的影响,阐明PgFtsZ GTPase的功能区域,为牙周病的防治提供实验依据.方法:将质粒pEZ1 (WtPgFtsZ,含野生型PgFtsZ的基因)、pYW1(Z△C01,从PgFtsZ的C末端去除73个氨基酸残基的变异型)、pYW2(Z△C02,从PgFtsZ的C末端去除128个氨基酸残基的变异型)、pYWN1(Z△N01,从PgFtsZ的N末端去除43个氨基酸残基的变异型)和pYWN2(Z△N02,从PgFtsZ的N末端去除205个氨基酸残基的变异型)分别导入E.coli BL21(DE3)pLysS中表达目的蛋白,然后分离和纯化WtPgFtsZ、Z△C01、Z△C02、Z△N01和Z△N02,将pET3a载体导入E.coli BL21 (DE3) pLysS中作为空白对照.采用Malachite green assay法检测Wt PgFtsZ、Z△C01、Z△C02、Z△N01和Z△N02的GTPase活性,沉淀法检测体外聚合功能,光学显微镜下观察Wt PgFtsZ和各种变异型PgFtsZs过表达时E.coli细胞形态变化.结果:除Z△N01外,Z△C01、Z△C02和Z△N02的GTPase的活性值均较Wt PgFtsZ降低(P<0.05),10 mmol·L-1 CaCl2可使Wt PgFtsZ和各种变异型PgFtsZs的活性下降(P<0.05);除Z△N02以外,10 mmol·L-1 CaC12均可诱导Wt PgFtsZ、Z△C01、Z△C02和Z△N01的体外聚合反应.Wt PgFtsZ、Z△C01和Z△C02在E.coli细胞中过表达时,细胞呈细长丝状,与仅含有pET3a载体作为空白对照的E.coli相比细胞明显变长;Z△N01和Z△N02在E.coli中过表达时,E.coli细胞形态与仅含有pET3a载体作为空白对照的E.coli细胞形态相似.结论:PgFtsZ N末端的Z△N01和Z△N02之间的162个氨基酸残基及C末端的128个氨基酸残基与PgFtsZ的GTPase活性有关,二价阳离子Ca2能抑制PgFtsZ的GTPase活性,促进其体外聚合的功能.
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野生型和变异型牙龈卟啉单胞菌FtsZs
GTPase的活性
牙龈卟啉单胞菌感染致患者慢性牙周炎发病的可能机制研究
牙龈卟啉单胞菌
感染
牙周炎
机制
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文献信息
篇名
牙龈卟啉单胞菌FtsZ的C末端和N末端氨基酸残基缺失对其GTPase活性的影响
来源期刊
吉林大学学报(医学版)
学科
医学
关键词
牙龈卟啉单胞菌
丝状温度敏感蛋白质Z
N末端
C末端
GTPase活性
Ca2+阳离子
年,卷(期)
2013,(5)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
898-902
页数
5页
分类号
R781.4
字数
3667字
语种
中文
DOI
10.7694/jldxyxb20130509
五维指标
作者信息
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张玉凤
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刘歆婵
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C末端
GTPase活性
Ca2+阳离子
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研究来源
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引文网络交叉学科
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期刊影响力
吉林大学学报(医学版)
主办单位:
吉林大学
出版周期:
双月刊
ISSN:
1671-587X
CN:
22-1342/R
开本:
大16开
出版地:
吉林省长春市新民大街828号
邮发代号:
12-23
创刊时间:
1959
语种:
chi
出版文献量(篇)
8631
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12
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