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摘要:
目的:探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)丝状温度敏感蛋白质(FtsZ)的C末端和N末端氨基酸残基缺失对其GTPase活性的影响,阐明PgFtsZ GTPase的功能区域,为牙周病的防治提供实验依据.方法:将质粒pEZ1 (WtPgFtsZ,含野生型PgFtsZ的基因)、pYW1(Z△C01,从PgFtsZ的C末端去除73个氨基酸残基的变异型)、pYW2(Z△C02,从PgFtsZ的C末端去除128个氨基酸残基的变异型)、pYWN1(Z△N01,从PgFtsZ的N末端去除43个氨基酸残基的变异型)和pYWN2(Z△N02,从PgFtsZ的N末端去除205个氨基酸残基的变异型)分别导入E.coli BL21(DE3)pLysS中表达目的蛋白,然后分离和纯化WtPgFtsZ、Z△C01、Z△C02、Z△N01和Z△N02,将pET3a载体导入E.coli BL21 (DE3) pLysS中作为空白对照.采用Malachite green assay法检测Wt PgFtsZ、Z△C01、Z△C02、Z△N01和Z△N02的GTPase活性,沉淀法检测体外聚合功能,光学显微镜下观察Wt PgFtsZ和各种变异型PgFtsZs过表达时E.coli细胞形态变化.结果:除Z△N01外,Z△C01、Z△C02和Z△N02的GTPase的活性值均较Wt PgFtsZ降低(P<0.05),10 mmol·L-1 CaCl2可使Wt PgFtsZ和各种变异型PgFtsZs的活性下降(P<0.05);除Z△N02以外,10 mmol·L-1 CaC12均可诱导Wt PgFtsZ、Z△C01、Z△C02和Z△N01的体外聚合反应.Wt PgFtsZ、Z△C01和Z△C02在E.coli细胞中过表达时,细胞呈细长丝状,与仅含有pET3a载体作为空白对照的E.coli相比细胞明显变长;Z△N01和Z△N02在E.coli中过表达时,E.coli细胞形态与仅含有pET3a载体作为空白对照的E.coli细胞形态相似.结论:PgFtsZ N末端的Z△N01和Z△N02之间的162个氨基酸残基及C末端的128个氨基酸残基与PgFtsZ的GTPase活性有关,二价阳离子Ca2能抑制PgFtsZ的GTPase活性,促进其体外聚合的功能.
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内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 牙龈卟啉单胞菌FtsZ的C末端和N末端氨基酸残基缺失对其GTPase活性的影响
来源期刊 吉林大学学报(医学版) 学科 医学
关键词 牙龈卟啉单胞菌 丝状温度敏感蛋白质Z N末端 C末端 GTPase活性 Ca2+阳离子
年,卷(期) 2013,(5) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 898-902
页数 5页 分类号 R781.4
字数 3667字 语种 中文
DOI 10.7694/jldxyxb20130509
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张玉凤 吉林大学口腔医院修复科 32 118 6.0 9.0
2 于维先 吉林大学口腔医院牙发育及颌骨重塑与再生吉林省重点实验室 33 39 4.0 5.0
3 王闻天 吉林大学口腔医院麻醉科 9 14 2.0 3.0
4 高爱超 吉林大学口腔医院牙发育及颌骨重塑与再生吉林省重点实验室 14 5 2.0 2.0
5 刘歆婵 北京大学口腔医学院 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
牙龈卟啉单胞菌
丝状温度敏感蛋白质Z
N末端
C末端
GTPase活性
Ca2+阳离子
研究起点
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相关学者/机构
期刊影响力
吉林大学学报(医学版)
双月刊
1671-587X
22-1342/R
大16开
吉林省长春市新民大街828号
12-23
1959
chi
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