猪圆环病毒贵州株ORF2基因的克隆及表达载体的构建

• 作者: 刘建 曾智勇 李春燕 汤德元 王凤 甘振磊 郝飞
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒 ORF2基因 原核表达载体 真核表达载体 构建
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 95-98
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+9.2
• 语种: 中文

摘要

为了研究猪圆环病毒(PCV)的分子生物学诊断技术和基因工程疫苗,试验根据GenBank公布的PCV ORF2基因的核苷酸序列设计1对特异性引物,从贵州省某猪场的疑似猪圆环病毒组织病料中提取DNA,采用PCR技术扩增PCV ORF2基因,克隆到pMD19-T载体并测序,将构建好的T载体双酶切,回收目的片段与pET-32a(+)载体及pcDNA3.1(+)载体连接并转化入TOP10中构建原核、真核表达载体,并将ORF2基因插到重组质粒pcDNA3.1-IL-2上,构建以IL-2融合表达真核载体.结果表明:克隆的PCV ORF2基因全长为719 bp,ORF为702 bp,编码233个氨基酸,与GenBank公布的PCV ORF2基因的核苷酸同源性为98.4％.说明试验成功克隆了猪圆环病毒贵州地方毒株ORF2基因,并成功构建了PCV ORF2原核、真核表达载体及以IL-2融合表达真核载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤德元		256	1165	16.0	26.0
2	曾智勇		205	619	12.0	17.0
3	李春燕		90	654	13.0	22.0
4	王凤		46	445	10.0	20.0
5	甘振磊		48	465	9.0	20.0
6	刘建		49	250	9.0	13.0
7	郝飞		48	260	9.0	14.0