shRNA对大鼠心肌细胞牛磺酸转运体的抑制作用

• 作者: 冯颖 刘梅 吴高峰 杨建成 杨群辉 胡建民
• 来源期刊: 动物营养学报
• 学科: 生物学
• 关键词: H9c2细胞 RNA干扰 牛磺酸转运体 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 分子营养
• 页码范围: 2643-2648
• 页数: 6页
• 分类号: Q7
• 字数: 4291字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-267x.2013.11.017

摘要

本试验旨在研究短发夹RNA (shRNA)对大鼠心肌细胞牛磺酸转运体(TauT)的抑制作用.根据已克隆的大鼠心肌TauT基因序列设计并构建了3个shRNAs(shRNA1#、shRNA2#、shRNA3#)及1个阴性对照shRNA表达载体,利用脂质体LipofectamineTM 2000将构建好的重组质粒shRNA1#、shRNA2#、shRNA3#及阴性对照质粒分别转染H9c2细胞,细胞分为对照组(未转染组)、shRNA-Neg组(阴性对照组)和3个转染组(shRNA1#组、shRNA2#组、shRNA3#组),每组3个重复.应用四唑盐(MTT)法检测H9c2细胞增殖情况,实时荧光定量PCR检测TauTmRNA表达水平.结果表明,与阴性对照组和未转染组比较,shRNA1#质粒仅在转染细胞后的24 h极显著降低了TauT mRNA表达水平(P＜0.01),shRNA2#质粒在转染细胞后的24、48、72 h均极显著降低了TauT mRNA表达水平(P＜0.01),shRNA3#质粒则是在转染细胞后的72 h极显著降低了TauT mRNA表达水平(P＜0.01);MTT检测结果表明,转染TauT shRNA1#、shRNA2#、shRNA3#入H9c2细胞24、48、72 h后,细胞增殖均未受到显著影响(P＞0.05).上述结果提示,shRNA2#重组质粒能有效抑制TauT基因的表达,且短期内未影响H9c2细胞增殖,为研究TauT基因及揭示牛磺酸在心肌细胞代谢中的作用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡建民	沈阳农业大学畜牧兽医学院	107	590	14.0	18.0
2	杨群辉	沈阳农业大学畜牧兽医学院	30	115	7.0	10.0
3	刘梅	沈阳农业大学畜牧兽医学院	53	397	11.0	17.0
4	杨建成	沈阳农业大学畜牧兽医学院	69	415	11.0	16.0
5	吴高峰	沈阳农业大学畜牧兽医学院	33	147	7.0	10.0
6	冯颖	沈阳农业大学畜牧兽医学院	85	785	14.0	25.0