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摘要:
目的 优化细胞免疫荧光染色技术结合激光扫描共聚焦显微镜技术的实验步骤,观察并定位Merm 1/Wbscr22在人肺癌细胞NCI-H1299中的表达,以期对后续深入研究Merm1/Wbscr22的分子功能提供技术支持.方法 采用Western blot 及细胞免疫荧光染色结合激光扫描共聚焦显微镜技术观察Merm1/Wbscr22在NCI-H1299细胞的表达与定位,改进并优化免疫荧光染色实验步骤.结果 Merml/Wbscr22蛋白在NCI-H1299细胞内过量表达,并定位于细胞核内.细胞免疫染色步骤显著地影响Texas Red-鬼笔环肽的非特异性染色及F-actin、Merm1/Wbscr22、细胞核DNA染色荧光的强度.结论 结合细胞免疫荧光染色技术与激光扫描共聚焦显微镜技术可以清楚地观察Merm1/Wbscr22在人肺癌细胞NCI-H1299的表达与定位,该技术的最优实验步骤是细胞固定、透膜、封闭、Texas Red-鬼笔环肽标记F-actin、一抗结合、二抗结合、DAPI标记细胞核DNA,最后共聚焦显微镜成像,这样既能减少Texas Red-鬼笔环肽的非特异性染色,各组分荧光强度又足够清晰利于观察.
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文献信息
篇名 利用优化的显微技术观察和定位Merm1/Wbscr22在人肺癌细胞NCI-H1299中的表达
来源期刊 医学研究杂志 学科
关键词 免疫荧光染色 激光扫描共聚焦显微镜 Merm1/Wbscr22
年,卷(期) 2013,(3) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 69-73
页数 5页 分类号
字数 3491字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 郑晓亮 浙江省医学科学院分子医学中心 59 294 10.0 15.0
2 颜冬梅 浙江省医学科学院分子医学中心 24 67 4.0 8.0
3 屠凌岚 浙江省医学科学院分子医学中心 32 166 6.0 12.0
4 王孝举 浙江省医学科学院分子医学中心 18 37 4.0 5.0
5 高明 浙江省医学科学院卫生学研究所 19 20 3.0 3.0
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研究主题发展历程
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免疫荧光染色
激光扫描共聚焦显微镜
Merm1/Wbscr22
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
医学研究杂志
月刊
1673-548X
11-5453/R
大16开
北京市朝阳区雅宝路3号
2-590
1972
chi
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11
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