异种肝前体细胞移植治疗急性肝损伤大鼠

• 作者: 万真 向俊西 吕毅 张晓刚 王浩华 郑幸龙 马佳 马锋
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 器官移植 细胞移植 肝移植 急性肝损伤 分化 植入 肝前体细胞 脾脏 Alb CK-19 异种 微环境 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2013,（53）
• 所属期刊栏目: 细胞移植
• 页码范围: 9132-9138
• 页数: 7页
• 分类号: R318
• 字数: 7678字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.53.006

摘要

背景:成体肝前体细胞可在受体肝脏内定植并分化为肝细胞.不过,异种肝前体细胞移植能否促进急性肝损伤的恢复,脾脏微环境能否促进移植物的存活和向肝细胞分化,尚没有研究.目的:评价异种肝前体细胞移植治疗急性肝损伤的作用;监测移植肝前体细胞在大鼠脾脏实质内的定植及向肝细胞的分化.方法:体外培养雄性小鼠来源的肝前体细胞系肝上皮样前体细胞.通过CCl4腹腔注射联合2/3肝切除构建急性肝损伤大鼠模型,进行肝上皮样前体细胞脾脏移植.在肝切除后1,5,14和21d,苏木精-伊红染色观察肝脏病理改变,全自动生化分析仪监测血清转氨酶变化,PCR反应检测脾脏组织Y染色体特异性序列Sry,脾脏CK-19和Alb免疫组织化学追踪移植肝上皮样前体细胞的植入和肝细胞分化.结果与结论:肝上皮样前体细胞可在体外长期培养,保持增殖能力和双向分化潜能.肝上皮样前体细胞脾脏移植后,肝损伤大鼠肝细胞肿胀明显减轻,丙氨酸转氨酶和天门冬氨酸转氨酶下降更明显.移植后1,5,14和21 d,脾脏DNA中均能检测到Sry序列.在整个实验期间CK-19阳性细胞在大鼠脾脏实质内始终存在.Alb阳性细胞在移植后5d在脾脏实质中出现,随后阳性细胞数逐渐增多.实验表明,移植肝前体细胞能在大鼠脾脏实质中植入,并分化为肝细胞,能有效促进CCl4腹腔注射联合2/3肝切除诱导的大鼠急性肝损伤的修复过程.