猪脑中硫氧还蛋白还原酶的纯化与表征

• 作者: 刘忠 刘晓 王一飞 邵方元 陈文波
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 硫氧还蛋白还原酶 纯化
• 年，卷（期）: 2013,（18）
• 所属期刊栏目: 动物科学·饲料科学
• 页码范围: 7832-7835,7885
• 页数: 5页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3942字
• 语种: 中文

摘要

[目的]用新的方法从猪脑中提取纯化硫氧还蛋白还原酶(TrxR)并对其进行表征.[方法]通过硫酸铵盐析、DEAE-SepharoseFast Flow弱阴离子交换凝胶色谱柱层析、Blue-Sepharose亲和色谱柱层析、Resource Q强阴离子交换色谱柱层析和Superdex 200 prepgrade凝胶过滤色谱柱层析等方法,从猪脑中分离并纯化TrxR.采用聚丙烯酰胺电泳法、等电聚焦法、DTNB还原法和胰岛素还原法对TrxR的性质进行表征.[结果]从猪脑中分离并纯化出TrxR,其纯度大于99％,是酶粗提液的6 000倍,最终产率为13.9％.猪脑TrxR的分子量为56.0 kD,等电点为5.0.以DTNB为底物测得其Km和kcat值分别为62.9 μmol/L和467 min-1,以硫氧还蛋白为底物测得其Km和kcat值分别为3.9μmol/L和2 813 min-1.[结论]用新的方法从猪脑中纯化得到较高纯度的TrxR,为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘晓	广东药学院广东省生物活性药物研究重点实验室	3	39	2.0	3.0
2	邵方元	广东药学院广东省生物活性药物研究重点实验室	3	39	2.0	3.0