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Clusterin基因沉默对脑胶质瘤U87细胞放射敏感性的影响
Clusterin基因沉默对脑胶质瘤U87细胞放射敏感性的影响
作者:
周伟
孙卯
张蕴蕴
陈晓品
黄锣
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
簇集蛋白
脑胶质瘤
放射敏感性
RNA干扰
摘要:
目的:研究通过慢病毒介导的RNA干扰技术沉默簇集蛋白(clusterin,CLU)基因表达对人脑胶质瘤U87细胞放射敏感性的影响.方法:设计和合成靶向CLU的短发夹RNA(short hairprin RNA,shRNA)序列(CLU shRNA1,CLU shRNA2),并构建到慢病毒的载体plentilox 3.7,以不针对任何基因的shRNA序列作为对照(对照shRNA).包被能成功表达各种shRNA载体的慢病毒.将慢病毒感染人脑胶质瘤U87细胞,Real-time PCR法和Western blot法测定CLU mRNA表达和蛋白质表达水平,证实干扰效果.给予不同放射剂量(2、4、6 Gy)处理后,通过四甲基偶氮唑盐(thiazolyl blue tetrazolium bxomide,MTT)法及流式细胞仪Annexin V/PI法检测脑胶质瘤U87细胞的存活率及凋亡率.Western blot方法筛选多个凋亡相关信号分子的改变.结果:靶向CLU基因的shRNA特异性地抑制了CLU mRNA和蛋白质的表达.MTT实验结果显示实验干扰组细胞在不同放射剂量下的脑胶质瘤实验U87细胞的存活率与对照组比较明显下降,差异具有统计学意义(4 Gy时,对照shRNA vs.CLU shRNA1:P=0.000,对照shRNA vs.CLU shRNA2:P=0.003;6 Gy时,对照shRNA vs.CLU shRNA1:P=0.000,对照shRNA vs.CLU shRNA2:P=0.000).流式细胞仪Annexin V/PI法检测结果表明:4 Gy放疗后2个实验组细胞凋亡率均明显增加,最高达(35.54±0.95)%,较对照组高2倍多,差异具有明显统计学意义(对照shRNA vs.CLU shRNA1:P=0.000;对照shRNA vs.CLU shRNA2:P=0.000).Western blot法发现CLU沉默可以显著上调促凋亡分子Bax蛋白水平.结论:CLU基因沉默可能通过调控Bax蛋白的表达,明显增强脑胶质瘤U87细胞对放射的敏感性,有望成为增加脑胶质瘤放射敏感性的新靶点.
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文献信息
篇名
Clusterin基因沉默对脑胶质瘤U87细胞放射敏感性的影响
来源期刊
重庆医科大学学报
学科
医学
关键词
簇集蛋白
脑胶质瘤
放射敏感性
RNA干扰
年,卷(期)
2014,(2)
所属期刊栏目
神经疾病
研究方向
页码范围
173-177
页数
5页
分类号
R322.81|R739.41
字数
语种
中文
DOI
10.13406/j.cnki.cyxb.2014.02.009
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引文网络
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研究主题发展历程
节点文献
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脑胶质瘤
放射敏感性
RNA干扰
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
重庆医科大学学报
主办单位:
重庆医科大学
出版周期:
月刊
ISSN:
0253-3626
CN:
50-1046/R
开本:
大16开
出版地:
重庆市渝中区医学院路1号
邮发代号:
创刊时间:
1976
语种:
chi
出版文献量(篇)
7628
总下载数(次)
10
总被引数(次)
36778
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