人脐带间充质干细胞原代培养方法的改良

• 作者: 李小战 李淑 李遇梅 许辉 马红
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 脐带间充质于细胞 原代培养 诱导分化
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 375-379
• 页数: 5页
• 分类号: R329.2
• 字数: 4143字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y140204

摘要

目的:探讨体外组织块培养原代人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)的改良方法,并观察其形态,免疫表型,成脂成骨分化等生物学特性.方法:从健康足月儿获得脐带,将血管剥离后,余下的结缔组织剪成小块,分别用传统植块法和改良植块法分离培养原代hUC-MSCs.MTT法检测细胞增殖情况并绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞免疫表型,成脂成骨诱导分化检测其分化潜能,化学染色鉴定诱导分化结果.结果:改良植块法脐带组织贴壁培养3～4d即可从组织块边缘长出长梭形成纤维样原代细胞,5～6d后细胞可长满80％,比传统植块法原代细胞培养周期缩短了一半以上时间,细胞传代后流水状或漩涡状生长,MTT法显示细胞增殖能力强,流式细胞仪检测提示CD90,CD105,CD73,CD166,CD29,CD44均阳性表达,阳性率均在95％以上,CD45和HLA-DR均阴性表达,阳性率低于2％;诱导分化实验及化学染色结果证实,该细胞具有成脂和成骨多向分化潜能.结论:应用与酶消化法相结合的改良植块法可以获得hUC-MSCs,比传统植块法缩短了原代培养周期,提高了细胞培养效率,所获得细胞贴壁生长,增殖能力强,表达间充质干细胞相关免疫表型,具有多向分化潜能,可在科研和临床应用中作为种子细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许辉	江苏大学附属医院皮肤科	42	109	5.0	8.0
2	李遇梅	江苏大学附属医院皮肤科	54	129	5.0	8.0
3	马红	江苏大学附属医院皮肤科	23	83	5.0	8.0
4	李淑	江苏大学附属医院皮肤科	4	5	2.0	2.0
5	李小战	江苏大学附属医院皮肤科	2	3	1.0	1.0