H3N8亚型马流感病毒VLPs的构建及其生物学特性分析

• 作者: 刘彦云 刘明 刘春国 刘飞 吕让 王丹 王伟 相文华
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 马流感病毒 H3N8亚型 HA基因 M1基因 杆状病毒双表达 病毒样颗粒
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 页码范围: 240-244
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.2
• 语种: 中文

摘要

为了构建含H3N8亚型马流感病毒HA蛋白和M1蛋白的病毒样颗粒疫苗,把A/equine/Xinjiang/3/2007 (H3N8)的HA基因和M1基因克隆到杆状病毒穿梭载体pFastBac Dual中,将得到的重组穿梭质粒pFBD-XJ3 HA-M1转化至DH10Bac感受态细胞,与杆状病毒骨架质粒Bacmid进行重组从而获得重组杆状病毒转座子rBac-XJ3 HA-M1,然后将其转染Sf9昆虫细胞,包装重组杆状病毒rBV-XJ3 HA-M1.通过PCR鉴定、细胞免疫组织化学试验、Western-blot分析以及血凝试验证明,HA蛋白和M1蛋白在昆虫细胞中能够有效表达,且表达产物具有良好的反应活性,表达的HA蛋白具有血凝活性.电镜观察发现,HA蛋白和M1蛋白能够稳定形成病毒样颗粒.上述研究结果为研制马流感亚单位疫苗提供了技术储备,也为马流感病毒蛋白的功能研究奠定了基础.