Ad.RGD-ING4-PTEN对MEG01人白血病细胞的抑制作用

• 作者: 杨吉成 王家融 盛伟华 缪竞诚 黄晨
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 腺病毒 ING4 PTEN 白血病
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 9-17
• 分类号: Q813
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20140302

摘要

目的:构建RGD修饰的ING4和PTEN双基因共表达重组腺病毒载体(Ad.RGD-ING4-PTEN),研究其对人白血病细胞MEG01的抑制作用.方法:采用AdEasyTM腺病毒重组系统,在本科室已成功构建的pAdTrack-CMV-ING4-polyA-promoter、pAdTrack-CMV-polyA-promoter腺病毒转移质粒的基础上,在多克隆酶切位点的Not Ⅰ、Xho Ⅰ间插入PTEN片段,得到pAdTrack-CMV-ING4-polyA-promoter-PTEN重组转移载体,与RGD-4C修饰的腺病毒骨架质粒pAdEasy-1 (RGD)同源重组后,经包装和扩增获得ING4和PTEN双基因共表达重组腺病毒Ad.RGD-ING4-PTEN.将Ad.RGD-ING4-PTEN体外感染人白血病细胞MEG01,检测腺病毒对MEG01细胞的感染效率,Western blot法检测外源基因ING4和PTEN在MEG01细胞中的表达,CCK8法检测外源基因的导入对MEG01细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测外源基因导入对MEG01细胞的凋亡和周期的影响.结果:鉴定结果显示,成功构建了Ad.RGD-ING4-PTEN双基因共表达腺病毒,其能有效地感染MEG01细胞.Western blot检测到ING4和PTEN在MEG01细胞中的表达；ING4和PTEN基因能明显抑制MEG01细胞的生长,诱导其凋亡并产生G2/M期阻滞作用,且双基因联合作用较单基因作用更明显.结论:成功构建了RGD-4C修饰的ING4和PTEN双基因共表达腺病毒载体Ad.RGD-ING4-PTEN.收获的腺病毒能有效感染人白血病MEG01细胞.Ad.RGD-ING4-PTEN具有抑制MEG01细胞的生长、诱导其凋亡及G2/M期阻滞的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	缪竞诚	苏州大学医学部	95	511	13.0	17.0
2	杨吉成	苏州大学医学部	164	943	16.0	20.0
3	盛伟华	苏州大学医学部	129	700	15.0	18.0
4	黄晨	苏州大学医学部	14	48	4.0	6.0
5	王家融	苏州大学医学部	4	17	2.0	4.0