烟尘慢性染毒致肺泡Ⅱ型上皮细胞恶性转化离体实验研究

• 作者: 唐莹 孟庆印 边莉 金克炜 阮永华 高倩
• 来源期刊: 中国职业医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肺泡Ⅱ型上皮细胞 RLE-6TN 云锡烟尘 恶性转化 肺表面活性蛋白 鼠双微体2 脆性组氨酸三联体 软琼脂克隆
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-25
• 分类号: R135.2|R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.11763/j.issn.2095-2619.2014.01.004

摘要

目的 建立模仿肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)暴露于云锡炼厂烟尘环境的离体研究模型.方法 以永生化ATⅡ(RLE-6TN细胞株)为实验对象,分为高、低剂量染毒组和空白对照组.前2组分别使用终浓度为200、50 mg/L的烟尘悬浊液在第1、3、5、7、9代对细胞染毒,同代对照组不加烟尘悬浊液同步培养.从第10代起,高、低剂量染毒组常规传代直至软琼脂克隆形成检测实验呈阳性.采用透视电镜观察细胞超微结构,流式细胞术观察细胞周期,免疫印迹法及免疫组织化学观察各组细胞肺表面活性蛋白(SP)-B、SP-C、鼠双微体2(MDM2)蛋白、脆性组氨酸三联体(FHIT)蛋白的改变.结果 染毒24 h后即可观察到烟尘对RLE-6TN细胞超微结构造成损伤,主要表现为板层小体变性且数量减少,以及细胞凋亡和坏死;转化后的细胞由圆形或类圆形铺路石样生长变为长梭形.高、低剂量染毒组细胞培养至25代时软琼脂克隆形成检测实验均呈阳性,克隆形成率分别为3.33‰和1.67‰;继续培养至35代观察高、低剂量染毒组克隆形成率分别为12.50‰和10.00‰,空白对照组始终没有克隆形成.高、低剂量染毒组克隆形成率与染毒培养代数相关性有统计学意义(P＜0.01),但与烟尘染毒剂量相关性无统计学意义(P＞0.05).流式细胞仪检测示高、低剂量染毒组G2/M期+S期的比例较空白对照组增高.高、低剂量染毒组第25、30代细胞MDM2蛋白阳性、SP-B及FHIT蛋白阴性,而空白对照组同代细胞MDM2蛋白阴性、SP-B及FHIT蛋白阳性.高、低剂量染毒组第25、30、35代细胞示SP-C失表达,空白对照组SP-C有表达.结论 ATⅡ长期暴露于云锡炼厂烟尘中可导致其恶性转化.ATⅡ特异性蛋白SP-B、SP-C、FHIT失表达,MDM2阳性表达可作为RLE-6TN细胞转化的参考指标.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	边莉	昆明医科大学第一附属医院病理科	23	51	2.0	6.0
2	阮永华	昆明医科大学基础医学院	14	26	3.0	4.0
3	高倩	昆明医科大学基础医学院	16	14	2.0	3.0
4	唐莹	昆明医科大学电子显微镜室	7	6	2.0	2.0
5	孟庆印	昆明医科大学附属肿瘤医院病理科	3	4	2.0	2.0
6	金克炜	昆明医科大学基础医学院	3	13	2.0	3.0