鸭疫里氏杆菌转座子随机突变库的构建

• 作者: 俞慧 倪欣涛 卢凤英 朱寅玉 王桂军 祁晶晶 胡青海 苗双 邢林林
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭疫里氏杆菌 转座子随机突变库 接合转导
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 页码范围: 351-355
• 页数: 5页
• 分类号: S852.612
• 语种: 中文

摘要

通过接合转导的方法构建鸭疫里氏杆菌Yb2和CH3株的Tn4351转座子突变库,以便筛选和鉴定鸭疫里氏杆菌的功能基因.先将携带质粒pEP4351(含Tn4351转座子序列)的大肠杆菌BW19851(pEP4351)作为供体,与受体菌鸭疫里氏杆菌强毒株Yb2或CH3株进行接合转导,使质粒pEP4351导入Yb2或CH3株细菌内,进而转座子Tn4351随机插入鸭疫里氏杆菌的基因组中,然后用含红霉素和卡那霉素的胰酶大豆琼脂平板进行阳性接合子的筛选.用PCR扩增鸭疫里氏杆菌16S rRNA基因和红霉素抗性基因EmF进行转座子插入突变株的鉴定,最终成功地构建了鸭疫里氏杆菌Yb2株和CH3株各包含3 100株和2 520株突变株的Tn4351转座子随机突变库,接合转导效率分别为1.7×10-6和3.9×10-6.转座子随机突变库的构建为下一步根据突变株表型的变异来筛选和鉴定鸭疫里氏杆菌的毒力相关等基因奠定了基础.