KCNJ11基因E23K基因多态对细胞膜电流的影响

• 作者: 夏小慧 杨爱宏 胡扬
• 来源期刊: 中国应用生理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: KCNJ11 基因多态性 膜片钳 细胞膜电流
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 23-26
• 页数: 4页
• 分类号: R363.1
• 字数: 2792字
• 语种: 中文

摘要

目的:KCNJ11基因E23K多态与心血管疾病、糖尿病等相关联,本实验通过研究人KCNJ11基因外显子处E23K多态对细胞膜电流密度的影响,探讨其与相关疾病关联的机制.方法:普通PCR法扩增KCNJ11基因外显子,重叠延伸PCR法使多态位点G→A突变,基因重组法将KCNJ11基因外显子(分别含23E和23K等位基因)插入pcDNA3.1/CT-GFP真核表达载体,脂质体转染法分别将重组质粒pcDNA3.1-KCNJ11 (E)和pcDNA3.1-KCNJ11 (K)转入HEK293T细胞.采用全细胞膜片钳技术,检测转染不同质粒的细胞膜电流密度.结果:PCR扩增获得长度为1 173 bp的KCNJ11基因外显子,成功构建pcDNA3.1-KCNJ11 (E)和pcDNA3.1-KCNJ11 (K)重组表达载体.全细胞膜片钳检测结果显示,两组转染不同质粒的HEK293T细胞表面均检测到正电流和负电流,细胞表面翻转电压均为50mV.两组细胞相比,转染pcDNA3.1-KCNJ11 (E)质粒的细胞表面电流明显高于转染pcDNA3.1-KCNJ11 (K)质粒的细胞(P＜0.05,n=10).结论:KCNJ11基因外显子E23K多态能导致细胞膜电流发生改变,为进一步研究多态位点与相关疾病的关联机制提供实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡扬		188	1469	19.0	27.0
2	夏小慧		23	114	6.0	9.0
3	杨爱宏		14	62	5.0	7.0