反义RNA介导的大肠杆菌非必需基因rpsF的基因沉默

• 作者: 唐欣茹 戈梅 殷瑜 陈代杰
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 反义RNA 非必需基因rpsF 基因沉默 操纵子 Real time RT-PCR
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 449-454
• 分类号: Q933
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.2014.04.012

摘要

[目的]探讨反义RNA技术介导的大肠杆菌非必需基因rpsF基因沉默导致菌体生长受抑制的原因.[方法]将rpsF基因5'端41-230 bp的片段反向插入带有末端配对结构的反义表达载体pHN678,获得重组质粒,导入大肠杆菌宿主获得反义RNA菌株Escherichia.coli/pHNF,并用诱导剂IPTG诱导反义RNA表达,通过与对照菌E.coli/pHN678的液体生长状态差异判断菌体生长表型;采用Real time RT-PCR方法跟踪分析转录水平.[结果]构建了针对rpsF的反义RNA菌株,且其生长受抑制程度与IPTG浓度呈正相关.IPTG浓度为100μmol/L时,菌体生长未受抑制,但靶基因rpsF的mRNA量降低了36％,而rpsR是位于同一操纵子下游的必需基因,其转录水平却未受影响;IPTG浓度为200 μmol/L时,菌体生长明显受抑制,经分析发现rpsR转录水平降低了12％.[结论]反义RNA菌株E.coli/pHNF生长受抑制的原因是由于此反义RNA引起了同一操纵子下另一必需基因rpsR的转录水平降低.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	戈梅		66	404	11.0	17.0
2	殷瑜	上海交通大学药学院	17	34	4.0	5.0
4	陈代杰	华东理工大学生物工程学院	10	12	2.0	2.0
7	唐欣茹	华东理工大学生物工程学院	1	2	1.0	1.0