牛白细胞介素-17真核表达载体的构建及在牛乳腺上皮细胞中的表达

• 作者: 修磊 刘秉春 崔新洁 王婷 王潇 胡庆亮 陶琳
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛白细胞介素-17 载体构建 牛乳腺上皮细胞 转染 表达
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 生物学? 食品科学
• 页码范围: 79-85
• 页数: 7页
• 分类号: S852.42
• 字数: 5448字
• 语种: 中文

摘要

[目的]在体外分离培养牛乳腺上皮原代细胞，并构建牛白细胞介素-17（ bIL-17）基因真核表达质粒，观察重组质粒在牛乳腺上皮细胞的表达．[方法]提取牛脾脏细胞总RNA，通过RT-PCR扩增bIL-17，将bIL-17连入pMD19-T进行测序，测序成功后将bIL-17插入含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达质粒pEGFP-N3上，构建真核表达质粒pEGFP-N3-bIL-17．用脂质体法将pEGFP-N3-bIL-17质粒转染于牛乳腺上皮细胞，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达，RT-PCR检测bIL-17基因在细胞内的转录，定量ELISA检测bIL-17蛋白在细胞内的表达情况．[结果和结论]成功构建具有绿色荧光和新霉素抗性的双选择标记的牛白细胞介素-17真核表达载体，并可在牛乳腺上皮细胞成功表达．

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王潇	内蒙古大学生命科学学院	18	91	6.0	8.0
2	胡庆亮	内蒙古大学生命科学学院	6	26	3.0	5.0
3	王婷	内蒙古大学生命科学学院	3	10	1.0	3.0
4	崔新洁	内蒙古大学生命科学学院	4	31	3.0	4.0
5	刘秉春	内蒙古大学生命科学学院	4	31	3.0	4.0
6	陶琳	内蒙古大学生命科学学院	2	11	1.0	2.0
7	修磊	内蒙古大学生命科学学院	3	17	2.0	3.0