快速诊断小鹅瘟PCR方法的优化建立

• 作者: 吴章青 张训海 王旋 赵磊 龚争
• 来源期刊: 安徽科技学院学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小鹅瘟 PCR 快速诊断
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 5-9
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 3969字
• 语种: 中文

摘要

为建立快速诊断小鹅瘟的PCR方法,根据已发表的GPV主要结构蛋白VP3基因序列,经多序列比对和Oligo 6.0软件分析设计特异性PCR引物.以微量法提取病鹅肝组织DNA,优化PCR反应引物退火温度、循环次数和鉴定其特异性,并与酚氯仿法和煮沸法进行同步对比研究.结果显示,建立的PCR检测方法能够特异性检测病鹅肝组织中GPV的核酸,其扩增片段大小为343bp,最佳退火温度为58℃,最佳循环次数为35次.微量法提取的病毒核酸PCR检测灵敏度分别是酚氯仿法的50倍和煮沸法的2500倍.该PCR检测方法不与鹅副黏病毒、禽流感病毒、传染性支气管炎病毒、鸭瘟病毒以及健康鹅肝组织发生交叉反应.本研究建立的GPV PCR检测方法能够快速诊断小鹅瘟.